过度训练大鼠肾组织il-6、il-18、凝血因子ⅷ相关抗原的表达及山莨菪碱干预的影响

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2、包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。f研究生签名≥美象父导师签名：关刊岛矿g年7月即日中文摘要过度训练大鼠肾组织IL-6、IL-18、凝血因子Ⅷ相关抗原的表达及山莨菪碱干预的影响摘要目的：过度训练可以引起机体组织器官的损伤，如何防治运动引起的脏器损伤是目前运动医学、军事医学及临床医学关注的课题。本研究采用大鼠游泳至力竭的方法，建立过度训练致急性肾损伤(over—traininginducedacutekidneyinjury，OTIAKI)动物模型，研究大鼠力竭后不同时间肾组织中IL-6、

3、IL-18、凝血因子Ⅷ相关抗原(FVB]RAg)表达的变化，观察山莨菪碱对上述指标的影响，旨在加深对OTIAKI发病机制的认识，为临床OTIAKI的防治提供新的理论和实验依据。方法：1．分组雄性健康Wistar大鼠36只，体重2002209，随机分为6组：安静对照组(CN组，平时不运动)；力竭运动后即刻组(ESI组，力竭运动后即刻采集标本)；力竭运动后6小时组(ES6h组，力竭运动后6小时采集标本)；力竭运动后24／J,时组(ES24h组，力竭运动后24／J,时采集标本)；山莨菪碱6小时组(AD6h组，游泳前20min于腹腔内注射山莨菪碱(10

4、mg／kg)，力竭运动后64,时采集标本)；山莨菪碱24dx时组(AD24h组，游泳前20min于腹腔内注射山莨菪碱(10mg／kg)，力竭运动后24d,时采集标本)。2．建立动物模型采用大鼠游泳至力竭法建立OTIAKI动物模型，各实验组大鼠于实验第一天适应性游泳30min，第二天放于水中，无负重游泳至力竭。力竭的标准为：①沉入水底超过10秒②游泳动中文摘要作明显不协调；③捞出后没有逃避反应，且放在平面无法完成翻正反射(个别大鼠有假死的现象，要注意判断)。3．取材各组大鼠于相应的时间点用乙醚麻醉，麻醉理想后于腹部正中切开，取左肾置入4oC4％多

5、聚甲醛中固定，备行石蜡切片；取右肾置于液氮中封存，备行IL-6、IL一18的酶联免疫(ELISA)法检测。4．观察指标常规制作石蜡切片，采用HE染色光镜下观察肾组织形态学变化：用ELISA法检测大鼠力竭后不同时间点的肾组织匀浆中IL-6、IL-18的含量；应用免疫组织化学(PV)法检测FⅧRAg在肾组织中的表达；应用图像分析系统对免疫组织化学结果进行半定量分析。5．统计学处理所有实验数据用均数±标准差(；±S)表示，用SPSSl2．0统计分析软件进行统计学处理，组间差异用one—wayANOVA(单因素方差分析)，有显著差异者用Student—

6、Newman-Keulstest(q检验)进行两两比较，PO．05)，山莨菪碱组与单纯力竭组相比，差异无统计学意义(P>O．05)。2．安静对照组大鼠肾组织中IL-18少量表达，力竭运动后即刻组显著增高(P

7、肾组织中IL—18水平明显减低(P<0．05)。3．免疫组化结果显示，FⅧRAg在安静对照组大鼠肾组织中有轻度表达，光镜下可见小管周围有散在的棕红色短线形物质，判定为毛细血管，力中文摘要竭运动后即刻组无明显变化。力竭运动后6小时组、力竭运动后24zJ、时组棕红色物质增多，山莨菪碱组棕红色物质增多并可见棕红色椭圆形套索，考虑为开放的毛细血管。图像分析统计结果显示，力竭运动后即刻组与安静对照组比较差异无统计学意义(P>O．05)，力竭运动后6小时组增多(P

8、肾组织中FV]]]RAg水平显著增多(P