ezrin蛋白在骨肉瘤侵袭转移中的作用及黄芩素对其表达的影响

《ezrin蛋白在骨肉瘤侵袭转移中的作用及黄芩素对其表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据中图分类号墼兰昼：lUDC610博士学位论文Ezrin蛋白在骨肉瘤侵袭转移中的作用及黄芩素对其表达的影响RoleofEzrinProteinintheInvasionandMetastasisofOsteosarcomaandEffectofBaicaleinonitsExpression作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：张健临床医学外科学湘雅三医院张朝跃论文答辩日期槛皇二17答辩委员会中南大学2014年5月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工

2、作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：缝也日期：巡年二厶二§学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将

3、本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：墨茎垒篓日期：赳年三月!日导师签名越日期：巡年白生日万方数据摘要第一部分Ezrin蛋白在骨肉瘤组织中的表达及其意义目的：探讨Ezrin蛋白在骨肉瘤组织中的表达及其与骨肉瘤临床病理特征的关系。方法：1．收集126例骨肉瘤组织石蜡标本及27例骨软骨瘤组织石蜡标本，通过免疫组化染色检测标本中Ezrin蛋白表达情况；2．分析骨肉瘤组织中Ezrin蛋白表达与患者性别、年龄以及肿瘤直径、病理分型、E

4、nnecking分期、位置、肺部转移等临床病理特征的关系。结果：1．骨肉瘤组织中Ezrin蛋白阳性率(81．74％)明显高于骨软骨瘤组织(29．63％)，差异有显著性(Z=35．63，P<0．01)；2．伴有肺部转移的骨肉瘤组织中Ezrin蛋白阳性率(97．78％)较无肺部转移者(72．84％)增加，差异有显著性(矿=15．68，P<0．05)，低分化骨肉瘤组织中Ezrin蛋白阳性率(94．87％)也高于中+高分化者(75．86％)(Z2=12．32，P<0．05)，但是在不同性别、年龄、肿瘤直径、Ennecking分期及

5、部位的骨肉瘤组织中Ezrin蛋白阳性率并无显著性差异(均19>0．05)。结论：Ezrin蛋白在骨肉瘤组织中明显升高，且与肿瘤肺转移及恶性程度相关。图8幅，表2个，参考文献23篇。关键词：骨肉瘤；Ezrin蛋白；免疫组化分类号：R738．1II万方数据第二部分EzrinsiRNA对MG．63细胞生物学行为的影响摘要目的：应用小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调Ezrin蛋白在骨肉瘤MG．63细胞中的表达，探讨Ezrin蛋白在骨肉瘤侵袭、转移中的作用。方法：1．设计3对EzrinsiRNA(EzrinsiRNAl、Ezr

6、insiRNA2、EzrinsiRNA3)，转染MG．63细胞，采用荧光实时定量PCR、Westernblotting检测细胞EzrinmRNA和蛋白表达水平，筛选出1对干预效果最好的EzrinsiRNA。2．将干预效果最好的Ezrinsi砌临、ScramblesiRNA分别转染MG一63细胞，并设立1组未转染的空白对照组，采用MTT法检测细胞增殖；3．通过Transwell迁移、侵袭实验检测细胞的迁移、侵袭能力，细胞黏附实验测定细胞的黏附能力4．利用Westernblotting检测基质金属蛋白酶．2(MMP．2)、基质

7、金属蛋白酶．9(MMP．9)、E一钙粘蛋白、N一钙粘蛋白、波形蛋白、Src、磷酸化Src(p．Src)、Akt、磷酸化Akt(p．Akt)表达；5．30只裸鼠随机分成3组：空白对照组(n=10)、ScramblesiRNA组(n=10)和EzrinsiRNA组(n=10)，分别通过鼠尾静脉注射未转染siRNA、转染ScramblesiRNA及EzrinsiRNA的MG一63细胞，第42天处死裸鼠，比较实验前后体重及肺表面结节个数。结果：1．EzrinsiRNA3对EzrinmRNA和蛋白表达的抑制作用优于EzrinsiRN

8、Al、EzrinsiRNA2(P