黄芩素对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制.pdf

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1、342细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmune1)2015，31(3·论著·文章编号：1007—8738(2015)03—0342—04黄芩素对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制唐志斌，李春，陈志伟(南华大学第一附属医院骨外科，湖南衡阳421001)【摘要]目的探讨黄芩素对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制。方法以骨肉瘤MG-63细胞为研究对象，分别加入20的培养液(对照组)或(0、100、200)~moVL黄芩素溶液处理细胞48h，应用MTF法分析细胞增殖情况，通过Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，荧光

2、实时定量PCR测定ezrinmRNA表达，采用Westernblot法检测ezrin蛋白及磷酸化ezrin(p-ezrin)蛋白表达，利用原位末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果(100、200)~moVL黄芩素组细胞增殖抑制率较0moL／L黄芩素组升高，且200~moVL黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于100~moVL黄芩素组。随着黄芩素浓度的增加，平均穿膜细胞数以及ezrinmRNA、ezrin蛋白、p-ezrin蛋白表达水平逐渐降低，而AI逐渐增加，与对照组和0~snol／L黄芩素组比较，差异均有显著降低，而0p

3、xaoVL黄芩素组与对照组相比无明显变化。结论黄芩素能够抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭，其机制可能与抑制ezrin蛋白表达和活性及促进肿瘤细胞凋亡有关。[关键词]黄芩素；骨肉瘤；ezrin蛋白；凋亡[中图分类号]R392．12，Q279，R285．5[文献标志码]AInhibitoryefectofbaicaleinontheproliferationandinvasionofosteosarcomacellsandmechanismTANGZhibin，LIChun，CHENZhiweiDepartmentofOrthopedics

4、，FirstAfiliatedHospital，UniversityofSouthChina，Hengyang421001，ChinaIAbstractIObjectiveToexploretheefectofbaicaleinontheproliferationandinvasionofosteosarcomacellsandjtsrelatedmechanism．MethodsOsteosarcernaMG-63cellsthatwerecultured／nv／trowererespectivelytreatedwith20uLcul

5、turemedium(controlgroup)，dehydratedalcohol(0wmol／Lbaicaleingroup)，100and200pmoVLbaicaleinsolutionfor48hours．CelIproliferationwasanalyzedbvM1_rassay．ThecelIinvasionabilitywasdetectedusingTranswelI⋯invasionassay．TheexpressionofezrinmRNAwasexaminedbyreal—timequantitativePCR．

6、Theexpressionsofezrinproteinandp-ezrinproteinweremeasuredusingWesternblotting．Apeptosisindex(AI)wasdeterminedbyterminaldeoxynucle~idyltransferase-mediateddUTPnickendIabeling(TUNEL)．ResultsTheinhibitoryratesofcelIproliferationsignificantlyincreasedin100and200iJmol／Lbaicale

7、ingroupsascomparedwith0pmol／Lbaicaleingroup．Moreover，thatwashigherin200pmol／Lbaicaleingroupthanin100wmol／Lbaicaleingroup．Incomparisonwithcontroland0wmol／Lbaicaleingroups，themeancellnumbersofpermeatedmembraneandlevelsofezrinmRNA．ezrinproteinandP-ezrinproteingraduallydecrea

8、sed．butA1wasgraduallyelevatedwiththeincreaseofbaicaleinconcentrations．whereastherewasnosignifica