干扰素γ对肾癌786-0细胞增殖的抑制作用及其机制-论文.pdf

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1、中国生物制品学杂志2014年2月第27卷第2期ChinJBiologicalsFebruary2014，Vo1．27No．2·197·治疗性制剂抑制作用及其机制陈雄，吴小候，罗春丽，张龙。，石军辉，陶佳1．重庆医科大学附属第一医院泌尿外科，重庆400016；2．重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016摘要：目的探讨干扰素(interferon-y，IFN'y)对人肾癌786．0细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法用不同浓度(1000、2000、3000、4000和5000U／m1)的IFN~／作用人肾癌786．0细胞不同时间，CCK．

2、8法检测细胞增殖抑制率；将786．0细胞分为试验组(加入900U／mlIFN',／)和细胞对照组(未作任何处理)，作用48h后，流式细胞术检测786—0细胞细胞周期的分布，RT-PCR法检测细胞中肝细胞黏附分子(hepatocytecelladhesionmolecule，hepaCAM)基因mRNA的转录水平，Westernblot法检测细胞中有丝分裂抑制缺陷蛋白1(mitoticarrestdeficiency1，MAD1)的表达水平；将腺病毒质粒hepaCAM及空腺病毒质粒瞬时转染786—0细胞，Westernblot检测细胞中hepaCAM及MAD1蛋白的表

3、达水平。结果IFN'y可抑制786．0细胞的增殖，且呈时间．剂量依赖性(P<0．05)；与细胞对照组相比，试验组细胞G。期细胞比例、hepaCAM基因mRNA的转录水平及MAD1蛋白的表达水平均明显升高(P均<0．01)；转染腺病毒质粒的786—0细胞中hepaCAM和MAD1蛋白的表达水平明显高于空腺病毒质粒组及空白对照组(P<0．05)。结论IFN-／可能通过hepaCAM．MAD1途径使细胞周期阻滞于G。期，从而抑制肾癌786．0细胞增殖，本实验为进一步研究肾癌的发生发展机制及有效治疗途径奠定了基础。关键词：干扰素；肾癌；786—0细胞；肝细胞黏附分子；有丝分

4、裂抑制缺陷蛋白1；细胞增殖中图分类号：Q511R737．11文献标识码：A文章编号：1004．5503(2014)02．0197．06Inhibitoryeffectofinterferononproliferationofrenalcancer786．0cellsandrelevantmechanismcHENXiong，WUXiao—hou，LUOChun．1i，ZHANGLong，SHIJun—hui，TAOJiaDepartmentofUrology,TheFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity

5、,Chongqing400016,ChinaCorrespondingauthor：Xiao—hou．E—mail：wuxiaohou80@hotmail．conAbstract：ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectofinterferon(IFN3')onproliferationofhumanrenalcancer786—0cellsaswellasthepossiblemechanism．MethodsThe786—0cellsweretreatedwithIFN~／atvariousconcentra—tions

6、(1000，2000，3000，4000and5000U／m1)，anddeterminedforproliferationlevelbycellcountingkit一8(CCK一8)method．The786-0cellsweredividedintotestandblankcontrolgroups．Thecellsintestgroupweretreatedwith900U／mlIFN~／for48h，whilethoseinblankcontrolgroupwereuntreated．Thecellcycleof786—0cellswasanalyzedb

7、yflowcytometry，whilethetranscriptionlevelofhepatocytecelladhesionmolecule(hepaCAM)mRNAbyRT-PCR，andtheexpressionlevelofmitoticarrestdeficiency1(MAD1)byWesternblot．The786—0cellsweretransfectedtransientlywithadenovirusplasmidcontaininghepaCAMandemptyadenovirusplasmid，anddeterminedforexp