金属螯合层析介质征求意见稿.doc

《金属螯合层析介质征求意见稿.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS07.080A20/39中华人民共和国国家标准GB/T╳╳GB/T╳╳╳╳-201╳金属螯合层析介质Metalchelatingchromatographicmedium（征求意见稿）（草案）200×-××-××发布200×-××-××实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会18前言本标准参考了GB/T1.1—2009的规则编写。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位：本标准主要起草人：18金属螯合亲和层析介质1范围本标准规定了金属螯合层析介质的技术要求、检测方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存。本标准适用于骨架为琼

2、脂糖微球的金属螯合层析介质的生产与检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1金属螯合层析介质metalchelatingchromatographicmedium将亚氨基二乙酸（IDA）或者次氮基三乙酸（NTA）键合在高流速琼脂糖微球上，再螯合金属离子Ni2+（或其它金属离子）而形成的一类层析介质。4技术要求4.1外观在光学显微镜下球形饱满，表面光滑，透明性良好。4.2理化性质金属

3、螯合亲和层析介质的理化性质应符合表1中的规定。表1金属螯合层析介质的主要性能参数检测项目技术指标18粒度范围/%(45.00μm~165μm)≥90平均粒径（μm）99.00±11.00配基密度IDA（μmolNi2+/mL）≥36NTA（μmolNi2+/mL）≥15.00动态载量IDA（mgHis-taggedLDH/mL）≥40.00NTA（mgHis-taggedLDH/mL）≥40.00在0.1Mpa压力下可达最高流速*（cm/h）≥270微生物污染（菌落数/mL悬浮液）<100化学稳定性脱落物（羟甲基糠醛）测定，%IDApH3≤0.16pH13≤0.

4、16NTApH3≤0.25pH13≤0.25*：层析柱Φ1.60cm×20.00cm(介质床层高度10.00cm),温度22℃（±3℃）,溶液为H2O的条件下测定。5试验方法本方法中所用的水，在未注明其他要求时，应符合GB/T6682中二级水的规格，所用试剂，在未注明其他规格时，均指分析纯（AR）。5.1外观5.1.1仪器5.1.1.1光学显微镜。5.1.1.2真空泵：极限真空0.1MPa。5.1.2测定步骤5.1.2.1样品处理用量筒量取5mL金属螯合层析介质，置于50mL砂芯漏斗中。用去三级水清洗5次每次2min，抽干5min。将洗净的介质置于烧杯中，介质上

5、应有2cm的三级水。混匀后得到金属螯合层析介质与水的混合体系。5.1.2.2样品观测前处理18用塑料吸管吸取1mL金属螯合层析介质与水的混合体系置于载玻片上，调整显微镜放大倍数。以视野里80%以上面积均为微球为标准，用塑料吸管增减载玻片上的微球，最后用盖玻片压上。5.1..3样品观测调节光学显微镜焦距，使视野中的影像清晰。拍摄琼脂糖白球照片并保存。5.2粒径及其分布5.2.1仪器5.2.2.1激光粒度仪。5.2.2.2塑料吸管。5.2.2.3玻璃滤瓶。5.2.2.4砂芯漏斗（G3）。5.2.2.5真空泵：极限真空0.10MPa5.2.2测定步骤5.2.2.1样品

6、处理方法同5.1.3.1。5.2.2.2样品检测设置测量颗粒类型为通用型，分散剂类型为水，分析模式为单峰模式，添加样品进行测定。5.2.4结果表示通过激光粒度仪的检测结果包括平均粒径值及其分布图，根据粒径分布（如图1中表格）按公式（1）计算45-165μm粒径范围内微球数量所占百分比。……………………………………（1）式中：W粒径——45-165μm粒径范围内微球数量所占百分比（%）；W1，W2，……Wx——符合45-165μm范围的各粒径范围百分比，例如图2中45.709μm-52.481μm的球所占百分比为3.08%。18图2金属螯合层析介质粒径分布图平均粒

7、径的计算方法：其中dBk为单个介质的粒径，为所统计的一定数量乳液滴的平均值，N为所统计的乳液滴的数目。5.2.5允许差同一试样三次测定结果之差，应不超过平均值的5%。5.3配基密度(金属离子(Ni2+)密度)测定5.3.1仪器5.3.2.5层析柱：Φ1.00cm×20.00cm。5.3.2.6滴定管。5.3.2溶液配制5.3.3.1氨-氯化铵缓冲液甲，pH10将氯化铵68.00g溶于蒸馏水300mL，加浓氨水570mL，用蒸馏水稀释至1000mL。5.3.3.2氨-氯化铵缓冲液乙，pH10称取氯化铵5.40g，加水50mL溶解后，加35mL浓氨水，最后用定容至1

8、00mL。5.3.3.3