靶向survivin的sirna联合5-fu转染抑制肝细胞株hepg2增殖的研究

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1、青岛大学硕士学位论文靶向survivin的siRNA联合5--FU转染抑制肝细胞株HepG2增殖的研究姓名：冯晶晶申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：雷炜20120602靶向survivin的siRNA联合5-FU转染抑制肝细胞株HepG2增殖的研究摘要目的：研究靶向survivin的(小分子干扰RNA)siRNA和(氟尿嘧啶)5-FU联用对肝癌细胞HepG2的增殖抑制及凋亡的影响。方法：将HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组、5一FU处理组、siVA转染组、5一FU+siRNA转染组。转染采用脂质体法。RT-PCR法检测HepG2细胞survivinmRNA转录水平

2、；MTT法检测靶向survivin的siRNA和5-FU对HepG2细胞增殖的抑制作用；流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况。结果：空白对照组、阴性对照组、5-FU处理组survivinmRNA表达无明显变化(P>O．05)，siRNA转染组、5一FU+siRNA转染组survivinmRNA表达明显下降(F=280．326，q=4．72’7．34，P

3、13568．68，q=110．47"--327．16，P

4、nti-proliferationeffectof(smallinterferenceRNA)siRNAagainstsurvivincombinedwith(．f1．．．．u．．．．o．．．．r．．o．．．．u．．．r．．．a．．．c．．—i．1)5-FUonhumanlivercancercelllineHepG2．Methods：HepG2cellscultureswe他dividedintof．vegroups：blankcontrolgroup，negativecontrolgroup，5-FUgroup，siRNA-survivingroup，siRNA-surv

5、ivin+5一FUgroup．LipofectamineTM2000wasusedtotransfectHepG2cell．TheexpressionofsurvivinmRNAwasdetectedbyRT-PCR．TheeffectsoncellproliferationandapoptosiswereanalyzedbyMTrassayandflowcytometryrespectively．Results：TheexperimentofRT-PCRshowedthattheexpressionofsurvivinmRNAinsiRNA-survivingroupand

6、siRNA-survivin+5一FUgroupwerelowerthanthatinothergroups(p<0．05)，butitslevelsinblankcontrolgroup，negativecontrolgroupand5-FUgrouphadnosignificantchangeQ>o．05)．TheMTTassayindicatedthattheantiproliferationrateofsiRNA-survivin+5一FUgroupwas51．38％±1．35．TheantiproliferationrateofthisgroupWashighert

7、hanthatinanyothergroup(p<0．05)．FlowcytometryWasindicatedthattheapoptosisrateofsiRNA-survivin+5-FUgroupWashigherthananyothergroup(p