znf278 sirna抑制胃癌细胞株ags增殖的实验研究

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1、·724ChinJGastroenterol，2013，Vo1．18，No12ZNF278siRNA抑制胃癌细胞株AGS增殖的实验研究田筱青孙丹凤房静远上海交通大学医学院附属仁济医院消化科上海市消化疾病研究所(200001)背景：ZNF278属C2H2型锌指蛋白，为参与生长发育的重要转录因子，其异常表达可能参与肿瘤发生。目的：研究ZNF278siRNA对胃癌细胞株AGS增殖和周期的影响。方法：以蛋白质印迹法检测正常胃上皮细胞株GES一1和胃癌细胞株AGS中ZNF278表达。构建ZNF278siRNA片段，并转染胃癌AGS细胞，转染阴性对照siRNA和RPMI1

2、640分别作为阴性对照组和空白对照组。以定量RT—PCR和蛋白质印迹法分别检测ZNF278mRNA和蛋白表达，利用MTT和细胞计数法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期变化。结果：胃癌AGS细胞中ZNF278表达明显高于正常胃上皮细胞GES一1。ZNF278siRNA转染胃癌AGS细胞后，ZNF278mRNA和蛋白表达均明显下调，而阴性对照组与空白对照组无明显差异。MITr法示ZNF278siRNA组AGS细胞增殖率显著低于阴性对照组(0．64±0．03对0．81±0．03，P<0．01)，细胞计数法示细胞数量亦显著降低[(4．I1±0．35)x10’对(

3、5．78±0．50)x10，P<0．01]，流式细胞术显示ZNF278siRNA组G0／G1期细胞明显增加而S期细胞明显减少(P<0．05)。结论：转染ZNF278siRNA可抑制胃癌AGS细胞增殖，细胞周期阻滞于G0／G1期。关键词ZNF278；RNA，小分子干扰；细胞增殖；细胞周期；胃肿瘤ExperimentalStudyonSuppressionofCellProliferationinGastricCancerCellLineAGSbyZNF278siRNATIANXiaoqing，SUNDanfeng，FANGJingyuan．DivisionofG

4、astroenterologyandHepatology，RenJiHospital，SchoolofMedicine，ShanghaiJiaoTongUniversity，ShanghaiInstituteofDigestiveDisease，Shanghai(200001)Correspondenceto：FANGJingyuan，Email：jingyuanfan007@126．cornBackground：ZNF278isanovelKrtippelCys2一His2一typezincfingerprotein．Itisanimportanttrans

5、criptionfactorinvolvedingrowthanddevelopment．AbnormalexpressionofZNF278mightbeinvolvedintumorigenesis．Aims：TostudytheinfluenceofZNF278siRNAoncellproliferationandcellcycleingastriccancercelllineAGS．Methods：ZNF278expressioninhumangastricepithelialcelllineGES一1andgastriccancercelllineA

6、GSwasdetectedbyWesternblotting．ZNF278siRNAwasconstructedandtransfectedintoAGScells．TransfeetionwithnegativesiRNAandRPMI1640wereservedasnegativecontrolsandblankcontrols，respectively．ExpressionsofZNF278mRNAandproteininAGScellsweredeterminedbyquantitativeRT—PCRandWesternblotting，respec

7、tively．CellproliferationwasassessedbyMTTassayandcellcountingassay．Cellcyclewasanalyzedbyflowcytometry．Results：TheexpressionofZNF278washigherinAGScellsthaninGES一1cells．ExpressionsofZNF278mRNAandproteinweresignificantlydecreasedinZNF278siRNAgroupthaninnegativecontrols．Nosignificantdif

8、ferencewasfoundbetw