硫酸镁联合奥沙利铂对人胃腺癌ags细胞株增殖抑制作用的研究

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时间:2018-12-09

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1、硫酸镁联合奥沙利钳对人胃腺癌AGS细胞株增殖抑制作用的研究[摘要]目的:通过体外研究,探讨硫酸镁联合奥沙利钳对人胃腺癌AGS细胞株增值的抵制作用。方法:将硫酸镁分别配置成250µg/ml>50µg/ml>10µg/ml>2µg/ml四个浓度溶液,分别标注为组1、组2、组3、组4,使用MTT法测定不同浓度下硫酸镁与奥沙利钳联合溶液对人胃腺癌AGS细胞株增殖抑制作用。结果:硫酸镁组及对照组方差具有显著性差异(P0.05),但与其他组具有显著性差异(P[关键词]硫酸镁;奥沙利韦白;人胃腺癌AGS细胞株增殖;体外研

2、究胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁国人的健康。钳类是胃癌化疗的主要药物,奥沙利钳(OXA)是继顺钳和卡钳之后的第三代钳类抗癌药物,但其对人体周围神经系统存在一定毒副作用,近几年,硫酸镁被临床试验证实可有效减轻OXA所致的神经毒性,我院实验室选择不同浓度的硫酸镁联合奥沙利钳,对人胃腺癌AGS细胞株增值抵制作用做体外研究,并将结果报告如下:1资料与方法1.1一般资料实验材料准备:细胞系一人胃腺癌AGS细胞株作为试验细胞系;材料一10%的小牛血清;硫酸镁;50mg奥沙利钳、500ml5%葡萄糖溶液;为5mg/ml的MTT试剂、100ml磷酸盐缓冲液。1

3、.2试验方法使用MTT法测定不同浓度下硫酸镁与奥沙利钳联合溶液对人胃腺癌AGS细胞株增殖抑制作用,具体方法如下:人胃腺癌AGS细胞株培养于10%的新生小牛血清、100u/ml青霉素和100u/ml链霉素的改良型RPMI-1630培养液,培养条件为37°C>5%CO2、每两至三天进行一次用0.25%胰酶消化传代。先使用50mg奥沙利钳,溶入500ml5%葡萄糖溶液,配成100µg/ml溶液,将其分为两组,一组溶液稀释2倍,配成50µg/ml溶液,另一组稀释10倍,配成10µg/ml溶液,用作流式细胞术检测细胞凋亡情况;将

4、2.5g/10ml/支硫酸镁溶入5%葡萄糖溶液,依次稀释5倍,分别配置成250µg/ml>50µg/ml>10µg/ml>2µg/ml四个浓度溶液。取浓度为5mg/ml的MTT0.5g,溶于100ml磷酸盐缓冲液中,使用0.22µm滤膜过滤细菌,放4°C避光处保存。调整对数生长期的人胃腺癌AGS细胞悬液浓度,使细胞密度为5X103/孔,边缘孔用无菌PBS填充。在37°C,5%CO2条件下孵育24小时,倒置于显微镜下观察,当细胞单层铺满孔底即可加入4组硫酸镁溶液中。奥沙利钳50µg/m

5、l,设6个复孔,每孔50µlo设置只加培养基的凋零孔及含人胃腺癌AGS细胞、5%葡萄糖溶液的培养液作为对照孔。加药后在37°C,5%CO2条件下孵育24小时,倒置显微镜下观察,如无污染则继续进行。每孔加入20µIMTT溶液,再培养4小时后,终止培养,吸去孔内培养液。每孔加入200µl二甲基亚砚,置MM-1微量振荡器上低速振荡约lOmin,待结晶物充分溶解。使用酶联免疫检测仪测量各孔吸光值(OD值),以平均值表示,MMT法重复三次。设置培养基、MTT、二甲亚飒孔作为凋零孔;含细胞、相同浓度药物溶解介质、培养液、MTT、二

6、甲亚砚作为对照孔。计算抑制率。抑制率=(对照组OD值一实验组OD值)/对照组OD值X100%1.3统计学方法使用SPSS10.0统计软件包进行统计分析,计量资料以()表示,所有数据方差齐性检验后行方差分析。P0.05),硫酸镁组及对照组方差具有显著性差异(P0.05),但与其他组具有显著性差异(P

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