奥沙利铂对人宫颈癌hela细胞株的体外作用.doc

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1、奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的体外作用编辑。【摘要】【目的】研究奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用及对Caspase-3活性的影响。【方法】用人宫颈癌HeLa细胞株经奥沙利铂处理后，MTT法测定细胞生长抑制率，透射电镜观察细胞形态学变化，流式细胞仪和原位末端标记技术法检测细胞凋亡率，比色法检测Caspase-3活性变化，，并利用AC-DEVD-CHO进行Caspase-3抑制试验。【结果】奥沙利铂(4〜64umol/L)在体外能以时间和剂量依赖的方式对宫颈癌HeLa细胞产生细胞毒作用并诱导其凋亡，奥沙利铂作用细胞株48h后，细胞呈现典型的凋亡细胞的

2、形态特征；并能增加HeLa细胞的Caspase_3活性，AC-DEVD-乙醛(AC-DEVD-CHO)可有效抑制奥沙利铂诱导的HeLa细胞凋亡。【结论】奥沙利铂在体外能抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖，诱导细胞凋亡，Caspase-3活化参与了奥沙利铂诱导HeLa细胞的凋亡过程。【关键词】宫颈癌；奥沙利销；生长抑制；Caspase-3Abstract：[ObjectiveiTostudytheeffectofoxaliplatinongrowthinhibitionandcaspase-3activityonhumancervicaIcancerHeLacells.

3、【Methods】HumancervicalcareinomaHeLacellsweretreatedwithoxaliplatin.CellgrowthratewasdeterminedwithMTTassay；ceeswereexaminedundey.Flowcytometryandinecellapoptosisrate.Activitiesofcasedbychromometry,anestbyAC-DEVD-CHO.llmorphologicchangrelectronmicroscopTUNELwasusedtoexampase-3weredeter

4、minditsinhibitionwast【Results】Oxaliplatin(4~64Pmol/L)indueedcytotoxicityandapoptosistohumancervicalcarcinomaHeLa-dependentanddose-alapoptoticmorpholaredinthecellstreafor48hours；Caspasegulatedinoxaliplatccells.Theoxaliplaapoptosiswasefficicellsinvitroistimedependent.Thetypicogicalfeatu

5、resappetedwithoxaliplatin-3activitywasup~rein-inducedapoptotitininducedHeLacellentlyinhibitedbyAC-DEVD-CHO.[Conclusion]OxaliplatincaninhibitHeLacellgrowthofeervicalcareinomaandinduceapoptosisinvitro.Caspase3activationmaybeinvolvedinoxaliplatin~inducedapoptosisofHeLacells.Keywords:cerv

6、icalcarcinoma；oxaliplatin；cellgrowth；caspase-3485-489］奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP))是第3代铂类化合物，其化学名为左旋反式二氨环己烷草酸铂。因为与顺铂作用机制有重要区别［1］，对各种顺铂耐药的肿瘤细胞株无交叉耐药，而且该药无明显肾毒性，耳毒性极微，血液学毒性较轻，神经系统毒性主要为剂量依赖性的自限性外周神经病变［2,3］，故近年来不但用于对顺铂耐药的多种人类癌症的二线治疗［4,5］，而且临床上已经有代替顺铂作为一线治疗的使用［6，7］。体内外试验及临床试验已证实了奥沙利铂对晚期大肠癌、胃癌、胰

7、腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等有较好疗效［8］，但有关奥沙利钴对人宫颂癌的作用及其机制的研究，国内外报道甚少。本实验通过研究奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用及对Caspase-3活性的影响，旨在为其在宫颈癌的临床应用提供实验依据。1材料和方法材料奥沙利铂由江苏恒瑞医药股份有限公司生产(No:06967)，用前以无血清培养液配制。HeLa细胞株由兰州军区总医院中心实验室保存。MTT为Sigma公司产品，用PBS配成5mg/mL。RPMI-1640培养液为GIBCO产品。胎牛血清：杭州四季青生物制品厂产品。原位末端转移酶标记法(TUNEL)试剂盒(武汉博士

8、德公司)，