奥沙利铂对人肺腺癌a549细胞的增殖凋亡及survivin和cyclind1表达的影响

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1、郑州大学硕士学位论文奥沙利铂对人肺腺癌A549细胞的增殖凋亡及Survivin和CyclinD1表达的影响姓名:闻爽申请学位级别:硕士专业:临床检验诊断学指导教师:秦东春201205摘要奥沙利铂对人肺腺癌A549细胞增殖凋亡及Survivin和CyclinDl表达的影响研究生闻爽‘导师秦东春郑州大学第一附属医院检验科河南郑州450052肿瘤是现代医学家力图攻克的世界性人类疾病。肺癌作为常见的呼吸系统恶性肿瘤之一,有着很高的病死率。由于多数患者确诊时已错过手术切除的最佳时期,因此,以铂类药物为基础的联合化

2、疗成为肺癌尤其是非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者的主要治疗手段。奥沙利铂做为第三代铂类抗癌药,与顺铂、卡铂相似,均以DNA为作用靶点,通过形成铂化DNA化合物而抑制DNA的合成,同时抑制DNA的修复。不同的是,奥沙利铂的抗瘤谱比顺铂和卡铂广,毒性相对较低,其对部分原发性或获得性顺铂或卡铂耐药的细胞株仍然有效。Survivin于1997年由耶鲁大学的Ambrosini等发现,做为凋亡抑制蛋白家族(InhibitorofApoptosisfamilyofprot

3、eins,lAP)最新成员,近年来,围绕Survivin对细胞凋亡的抑制作用及对细胞周期的调控作用已有部分研究,而对Survivin基因的表达与化疗药物的疗效以及肿瘤的耐药性的研究目前较少。CyclinDl作为典型的GI期细胞周期蛋白,其过表达会导致GI/S期细胞关键点缺陷,在肿瘤的发生发展中起到重要作用。Survivin和CyclinDl分别从抑制细胞凋亡和促进细胞增殖两方面起到促进肿瘤细胞生长的作用,在用奥沙利铂治疗肺癌患者的过程中,这两种基因的表达变化及其与药物疗效的关系,目前研究较少。摘要目的研

4、究舆沙利铂(Oxaliplatin,LoOPH,OXA)对人肺腺癌A549细胞株的生长抑制作用和对Survivin、CyclinDl基因表达的影响,探讨奥沙利铂抑制肺癌细胞增殖豹枕制。方法1.以不同浓度(0,7.8l,15.63,31.25,62.50,125“g/m1)的奥沙利铂干预体外培养的肺腺癌细胞株A549,分别于24、48和72小时后,采用MTT方法检测缨胞光密度僮,分析A549细胞的增蘧活性。2.采用流式细胞术检测药物处理后细胞周期变化。3.采用Hoechst33342染色方法在荧光显微镜下

5、观察药物处理后细胞形态变化。4.采用逆转录一聚合酶链反痘(赆Pe爻)方法检测药物处理前后Survivin和CyclinDl的mRNA表达情况。5.所有实验数据采用SPSSl7.0软件分析。计量资料以均数土标准差(工士s)表示。多样本均数比较,经方差齐性检验后,采用单因素方差分析(F检验)或Kruskal。wallis检验,并进一步做多重比较(Bonferroni检验),检验水准为a=0。05。结果:1.奥沙利铂能有效抑制A549细胞的增殖,24h、48h、72h三个时间点处理后,五个浓度组的细胞增殖抑制

6、率与同一时闻点对照组相比,差异有统计学意义沪

7、Survivin、CyclinDl基因mRNA的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义妒

8、ndSurvivin,CyelinDlexpressionsofLungAdenocarcinomaCellLineA549PostgraduateShuangWenTutorDongchunQinTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,LaboratoryZhengzhouHenan450052,ChinaTumoriSoneoftheworldwidehumandiseaseswh

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