间歇性低氧对新生小鼠脑神经发生和pax6表达的影响

《间歇性低氧对新生小鼠脑神经发生和pax6表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、厦门大学硕士学位论文间歇性低氧对新生小鼠脑神经发生和pax6表达的影响姓名：黄永霞申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：张家兴201204摘要目的我们前期研究发现，出生后间歇性低压低氧暴露能够增强小鼠空间记忆，但同时损害联合记忆。已知低氧能够诱导神经发生，而转录因子Pax6(pairedhomebox6)在胚胎神经系统发育过程中能够调节神经细胞的增殖和分化。因此本研究观察出间歇性低氧对新生小鼠脑神经发生和Pax6表达的影响，以期探明其对记忆影响的神经机制。材料和方法新生小鼠出生后立即分别暴露于模拟高原海拔2千米(16．0％02；Pa02，60mmHg)和

2、5千米(10．8％02；Pa02，41mmHg)低压低氧环境，每天低氧暴露4小时，连续低氧4周。低氧结束后小鼠常氧环境分组饲养1周和4周。对照组为不低氧暴露小鼠(设为海平面，21％O，)。为了观察神经发生情况，低氧结束后连续3天注射5．溴脱氧尿嘧啶核苷(5．Bromo．2．deoxvUridine，BrdU)，每天一次；为了观察新生神经细胞是否能够与原有神经细胞建立联系，每组小鼠在处死前2小时给予足底电刺激，免疫荧光方法用来观察BrdU和c．fos在脑内的表达情况并进行定位分析；为了观察低氧对Pax6表达的影响，分别用免疫荧光和westem-blot技术对

3、Pax6在脑内表达情况进行定位和定量分析。结果1．低氧对神经发生的影响(1)与对照组相比，低氧暴露4周小鼠在脑内OV、LV、pir、Or、DG、门、丘脑和运动皮质等区域存在BrdU阳性细胞，而且2千米低氧处理组的BrdU阳性细胞明显比5千米低氧处理组的BrdU阳性细胞多。(2)进一步研究发现，BrdU与NeuN和GFAP都共存。(3)BrdU阳性细胞可以持续存活到低氧结束后4周。摘要(4)低氧结束后4周，发现c．fos表达于新生的NeuN阳性细胞。2．低氧对PaX6表达的影响(1)在正常对照30天龄小鼠中，PaX6在多个脑区表达，包括OV、VBD、VP、L

4、V、pir、M、aca、Tu、LSI、LSV、BSTLD、MPOM、LPO、3V、Pe、LH、VMH、BLA、BMA、Aco、BIjV、St、LDVL、MGP、VMHDM、alV、Or、PLCo、PMCo、Mtu、BSTAI、MePD、MePV、PH、nS、ec、AS仃、BMP、VPM、VM、VPL、DG、LMol、FC、SubG、RPF、ZⅣ、ZID、MM。(2)低氧4周结束后(出生后30天)，模拟高原2千米低压低氧处理组表达Pax6的核团有OV、Pir、LV、DG、MTu、BMP和PLCo；模拟高原5千米低压低氧处理的实验动物中表达Pax6的区域有OV

5、、pir、or、Tu、M、VDB、LV、VP、LSI、LSV、MPOM、DM、MCPO、PLCo、MGP、Pe、LH、VMH、BMA、BLA、LDVL和MePD。(3)低氧暴露4周后，Pa)【6与NeuN和GFAP都共存表达，并且小鼠脑内可见Pa)【6与BrdU共染。(4)Westem-blot定量结果显示：①横向比较发现，在低氧结束后和低氧结束后1周，与对照组比较，2千米和5千米低氧暴露小鼠(244．544和245．545表示)的Pa)【6表达量显著减少；②纵向比较低氧结束后、低氧结束后1周和低氧结束后4周小鼠发现，对照组、2千米低氧组和5千米低氧组脑内

6、Pax6的表达量都逐渐增加。相对于对照组的增加，5千米低氧出生后8周处死实验动物(548表示)Pa)【6表达量比对照组8周处死实验动物(048表示)显著增多。结论1．出生后间歇性低压低氧暴露可以促进小鼠脑神经发生，这种新发生的细胞可以同时分化为神经细胞和星形胶质细胞。新发生的细胞可以长时间存活，并可与己有的成熟神经细胞建立神经环路连接。2．出生后脑内仍然有大量脑区的神经细胞和胶质细胞都表达Pa)【6。出生后摘要低氧显著减少Pax6在脑内多个区域的表达。3．在低氧暴露小鼠脑内，Pa)(6可见与BrdU共同表达于NeuN阳性细胞，提示Pax6可能参与了低氧诱导

7、神经细胞的发生。关键词：间歇性低氧；神经发生；Pax6Abst阳CtobjectiVesAbstractOurpreviouSstudyf．oulldt11atintemittenthypoxiaenhaIlcedspatialmemoryw11iledepressedtheassociativememo巧．Itiswelll【nowntllath)rpoxiacouldinduceneurogenesis，andtllePaX6(pairedhomebox6)playsanimportantroleinregulatingtheneurogenesisa

8、Ilddi岱；remiationofmeneⅣecellsd嘶ng