sle患者tfh细胞产生机制初步研究

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1、东南大学硕士学位论文SLE患者Tfh细胞产生机制初步研究姓名:陈京京申请学位级别:硕士专业:临床医学指导教师:冯学兵2012-06-04中文摘要第一部分SLE患者外周血中TnI细胞表达的研究东南大学医学院研究生陈京京导师冯学兵目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CXCR5+PDl+/CD4+T淋巴细胞(即滤泡辅助性T细胞,Till)的百分比及与健康对照相比的变化情况,分析其与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、自身抗体及临床指标的相关性,探讨其在SLE发病机制中的作用。方法:收集20例活动期、21例非活动期SLE患者及22例健康对照外周血,分离外

2、周血单个核细胞(PBMC),标记流式抗体(CD4、PDl、CXCR5),以鼠抗人IgGl作为PDI同型对照,采用流式细胞术检测CxCR5+PDl+T细胞占CD4+T细胞的百分比。酶联免疫吸附法(ELIsA)检测血清中抗核抗体(ANA)、抗ds.DNA的表达。以大于健康对照X+2s为界,将SLE患者分为Tfh细胞高表达组和低表达组,并根据临床症状或实验室检查结果比较两组间的差异。不同组间行Mann.Whitney或Fisher’sexact检验;Tfh细胞比例与SLEDAI的相关性采用Pearson相关分析法,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:SLE患

3、者PBMC中Tfh细胞的百分比高于健康对照组(∥0.05),其中活动组显著高于对照组(∥0.05),而非活动组与对照组之间差异无统计学意义(矿O.05)。TfIl细胞百分比与SLEDAI、ANA呈『F相关(p<0.05)。与Tfh细胞低表达组相比,高表达组与抗.SSA相关(∥0.05),而与其他临床及实验室指标无相关(p>O.05)。结论:SLE患者外周血中Tfh细胞比例升高,并与SLEDAI、ANA呈正相关,Till细胞高表达组与抗.SSA相关,提示这类细胞参与SLE发病并在疾病的活动过程中起作用。关键词:红斑狼疮;系统性:滤泡辅助性T细胞;抗核抗体东南

4、人学硕.}:学位论文第二部分IL.21及地塞米松对SLE患者Tfla细胞表达的影响东南大学医学院研究生陈京京导师冯学兵目的:通过体外实验观察白细胞介素.21(IL.21)及地塞米松(Dex)对Tfh细胞表达的调控作用并初步探讨其可能的机制。方法:收集11例SLE患者外周血,分离PBMC,分对照组、rIL.21组及rlL.21+Dex组(rlL-21浓度为200ng/lxL、Dex浓度为1x10"6M/L)体外分别培养24、72小时;另分离20例SLE患者PBMC,分对照组及Dex组(Dex浓度分别为5x10~、lxl0击M/L)体外培养24小时(每组细胞数

5、相同,平均约106个/孔),上述样本均标记CD4、PDl、CXCR5,检测PBMC中Till的百分比。ELISA检测上清中ANA的表达。Mann.Whitney秩和检验行组间差异比较,以pO.05);Dex组显著降低Tfh细胞的百分比,并具有浓度依赖性(∥0.05)

6、。各组上清中ANA差异无统计学意义(p>O.05)。结论:IL.21能够促进SLE患者Tfh细胞的表达,Dex对SLE患者Tfh细胞的表达具有抑制作用,并且Dex对IL.21促进的Tfh细胞的表达起抑制作用。关键词:红斑狼疮;系统性;滤泡辅助性T细胞;地塞米松;白细胞介素一21;抗核抗体中文摘要第三部分微小IⅢA表达在SLE发病中的临床意义东南大学医学院研究生陈京京导师冯学兵目的:研究骨形念发生蛋白(BoneMorphogeneticProtein,BMP)通路相关微小RNA一21、.155(miR.21、miR.155)在SLE中的表达情况及与SLE临床

7、相关疾病指标的关联,探讨miRNA与疾病表现及自身抗体产生的关系,推测其在SLE发病机制中的作用。方法:收集59例SLE患者和25例健康对照外周血,分离PBMC,Trizol法提取总RNA,逆转录过程中加polyA尾,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术进行检测。根据临床症状或实验室检查结果将SLE患者分组,不同组间行Mann—Whitney秩和检验,以p

8、.155表达水平显著升高(∥O.05);与无LN组相比,LN组SL

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