高糖刺激足细胞产生微囊泡及其机制的初步研究

《高糖刺激足细胞产生微囊泡及其机制的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R587．1密级：学位类别：科学学位口专业学位团O学校代码：10062学号：2010602601学科门类：医学又坪眚斜袁辱硕士学位论文MLASTER’SDISSERTATION论文题目：高糖刺激足细胞产生微囊泡及其机制的初步研究TITLEStudyofthemechanismofhighglucoseprovokesthegenerationofmicrovesiclesfrompodocytes一级学科：临床医学二级学科：内科学内分泌与代谢病论文作者：陈玉林指导教师：孙丽荣教授导师组成员：李明珍副主任医师聂秀玲副

2、主任医师天津医科大学研究生院二。一三年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立迸行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：堕!华日期：二r弓年，月彳日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、

3、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密口，在——年解密后适用本授权书。本论文属于不保密团。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名：导师签名：日期：力J乡加f，日叩儿1，月月L^岁年年天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：观察高糖对体外培养的小鼠肾小球足细胞MV产生的影响，初步探讨其产生机制。方法：体外培养小鼠足细胞系MPC．5。应用ELISA法检测足细胞MV产生，流式细胞仪检测足细胞凋亡，免疫荧光法检测足细胞ROS产生，Westernblottin

4、g法检测足细胞p-ERKl／2／ERKl／2、p-p38／p38和p-JNK／JNK蛋白的表达。应用SPSSl6．0统计软件进行数据处理分析。多组数据采用单因素方差分析(ANOVA)，Tukey法检验，p<0．05为差异有统计学意义。应用Image—ProPlus6．0软件分析荧光强度，测定ROS。应用ImageJ分析Westernblotting图像的目标带光密度值。结果：，1．随高糖孵育时间的延长，M-Ms产生随之增加，呈时间依赖性(图3)。24h时足细胞产生的MVs大约是Oh的4倍(矿0．01)，48h时足细胞产生的

5、MVs大约是0h的12倍(仄O．01)。2．高糖对足细胞凋亡的影响：与NC组相比，MN组凋亡率差异无统计学意义(p>0．05)，HG组可见明显细胞凋亡p

6、)，但仍处于较高水平。4．高糖对足细胞p-ERKl／2／ERKl／2、p-p38／p38和p-JNK／JNK蛋白表达的影响：(1)随高糖处理时间延长，p-ERKl／2蛋白相对表达量呈上升趋势，0．5h时p-ERKl／2蛋白相对表达量明显增多(矿O．01)，是oh的2倍，2h、4h、6h、12h时分别是0h的2、2．3、2．7、2．2倍(p<0。01)，可见6h达峰，12h时明显降低(正0．01)，但仍处于较高水平；(2)随高糖处理时间延长，p-p38蛋白相对表达天津医科大学硕士学位论文量呈先升高后降低趋势，0．5h时p-p

7、38蛋白相对表达量明显增多(删．01)，是0h的7．6倍，2h、4h、6h时分别是0h的8．8、7．1、6．3倍(p0．05)。5．ERK抑制剂对足细胞MWs产生的影响：HG+ERKi组与HG组相比，MVs产生差异无统计学意义(p=O．232)。结论：1．高糖能刺激足细胞M'Vs产生和ROS生成，呈时间依赖性，伴随足细胞凋亡的发生。2．高糖环境下，ERKl／2通路和p-38MAPK通路活化。3．ERK抑制剂U0126

8、未能降低高糖刺激足细胞Mrs产生，ERKl／2通路可能未参与高糖刺激足细胞Ⅲs产生，至于p38MAPK通路是否参与其中，尚需进一步实验验证。关键词：糖尿病肾病足细胞氧化应激MV凋亡II天津医科大学硕士学位论文AbstractObjective：Toinvestigatetheinfluenceofhig