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时间:2019-02-21
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1、徐州医学院硕士学位论文CpGODN2395对新生小鼠MCMV感染免疫功能的影响姓名:曹杨申请学位级别:硕士专业:儿科学指导教师:王军2012-02徐州医学院硕士学位论文CpGODN2395对新生小鼠MCMV感染免疫功能的影响示≯HIⅧ中文摘要目的用腹腔注射小鼠巨细胞病毒(murinecytomegaloVims,MCMV)的方法建立BALB/C小鼠全身型MCMV感染模型。分为空白对照组、MCMV组和CpGODN2395治疗组,通过对一些体液免疫指标的对比,以明确体液免疫在新生小鼠MCMV感染中的作用,为今后CMV感染的治疗及药物的研究提供理想的亚厶l口。方法
2、将出生3天内的新生BALB/C小鼠随机(随机数字表)0DN2395治疗组,每组30只。对照组:腹腔注射0.9%氯化钠20“1隔日1次;感染组:腹腔注射MCMV20¨11次,从接种M(:MV当日起隔日腹腔注射0.9%氯化钠20¨l;CpGODN2395治疗组:腹腔注射MCMV20u11次,从接种MCMV当日起隔日腹腔注射CpGODN239520mj班g。每组分为3天、7天、14天三个亚组,每亚组10只。饲养期问,母乳喂养,每日观察小鼠的生长发育情况。分别在3、7、14天断髓处死小鼠,留取血清及肝、脾组织,经处理后行病理观察、PCR、westenl及ELISA分
3、析。结果1.MCMVSmith毒株的TCII)50=105·31/m1。2.MCMV-DNAPCR结果空白对照组肝脏MCMV-DNAPCR未出现阳性条带,其余两组均出现阳性条带,MCl以V组在3、7和14天时肝脏组织MCMVDNA含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。Cp(j0DN2395治疗组肝脏组织MCMVDNA含量在7天时达高峰,14天时明显下降,三个时间点肝脏组织MCMVDNA含量均低于感染组(卜<0.05)。3.病理切片结:果MCMV感染新生小鼠3天时肝脏组织HE染色可见炎性细胞浸润,肝细胞肿胀变性,表现为体积变大、胞浆空淡;7天时病变加重达高
4、峰,气徐州医学院硕士学位论文可见大泡性脂肪变,大量炎性细胞浸润,肝细胞大片状坏死;在第14天仍保持较高水平。0DN2395治疗组3天时肝脏HE染色与MCMV组类似,7天时肝脏l{E染色亦可见大泡性脂肪变、炎性细胞浸润,但14天时肝细胞肿胀、变性较MCMV组明显好转,仍有炎性细胞浸润。4.空白对照组死亡率较其他组低、生长发育情况(体重、身长、毛发色泽、精神及食欲等)较其他组好,而CpGODN2395治疗组较MCMV组死亡率低生长发育状况良好。5.West‘强1blot法测各组肝脏TLR9蛋白均出现阳性条带,其中MCMV组同一时间点均较空白对照组高(P5、)。CpGODN2395治疗组同一时间点表达高于对照组和Ⅳ[CMV组,7天时MCMV组和CpG0DN2395组表达高于3天、14天(P<0.05)。6.各组肝、脾脏IL.4、IL.6mRNA均出现阳性条带,同一时问点MCMV组表达较空白对照组高(P<0.05)。CpGODN2395组在各时问点均较其他两组表达高,在7天时MCMV组和CpG0DN2395组较3天、14天高(P<0.05)。肝脏和脾脏两指标的表达趋势一致。7.ELIsA法测小鼠血清中空白组IL.4、IL.6表达在各时间点无明显差异,同一时间点MCMV组表达较空白对照组高(P6、DN2395组在各时间点均较其他两组表达高,在7天时MCMV组和CpGODN2395组较3天、14:天高(P<0.05)。同样方法测血清中谷丙转氨酶(ALT),空白对照组与MCMV组和CpGODN2395治疗组相比差异有统计学意义(P7、医学院硕士学位论文治疗作用关键词新生小鼠;先天性MCMV感染;体液免疫;cpGODN2395;徐州医学院硕士学位论文————————一—————————————————————————————————————一——TheeffectofCpGoDN2395tothenewbornmiceinfectedbyobjectiveMCMVonimmuneAbstractTbexplorethee丘bctsandmechanismsofhumoralimmumtyinthesystemicin:fectionmodelofnewbomBALB/Cmicewithmu8、rinecytomegaloviIus(McMV)Ⅱ
5、)。CpGODN2395治疗组同一时间点表达高于对照组和Ⅳ[CMV组,7天时MCMV组和CpG0DN2395组表达高于3天、14天(P<0.05)。6.各组肝、脾脏IL.4、IL.6mRNA均出现阳性条带,同一时问点MCMV组表达较空白对照组高(P<0.05)。CpGODN2395组在各时问点均较其他两组表达高,在7天时MCMV组和CpG0DN2395组较3天、14天高(P<0.05)。肝脏和脾脏两指标的表达趋势一致。7.ELIsA法测小鼠血清中空白组IL.4、IL.6表达在各时间点无明显差异,同一时间点MCMV组表达较空白对照组高(P6、DN2395组在各时间点均较其他两组表达高,在7天时MCMV组和CpGODN2395组较3天、14:天高(P<0.05)。同样方法测血清中谷丙转氨酶(ALT),空白对照组与MCMV组和CpGODN2395治疗组相比差异有统计学意义(P7、医学院硕士学位论文治疗作用关键词新生小鼠;先天性MCMV感染;体液免疫;cpGODN2395;徐州医学院硕士学位论文————————一—————————————————————————————————————一——TheeffectofCpGoDN2395tothenewbornmiceinfectedbyobjectiveMCMVonimmuneAbstractTbexplorethee丘bctsandmechanismsofhumoralimmumtyinthesystemicin:fectionmodelofnewbomBALB/Cmicewithmu8、rinecytomegaloviIus(McMV)Ⅱ
6、DN2395组在各时间点均较其他两组表达高,在7天时MCMV组和CpGODN2395组较3天、14:天高(P<0.05)。同样方法测血清中谷丙转氨酶(ALT),空白对照组与MCMV组和CpGODN2395治疗组相比差异有统计学意义(P7、医学院硕士学位论文治疗作用关键词新生小鼠;先天性MCMV感染;体液免疫;cpGODN2395;徐州医学院硕士学位论文————————一—————————————————————————————————————一——TheeffectofCpGoDN2395tothenewbornmiceinfectedbyobjectiveMCMVonimmuneAbstractTbexplorethee丘bctsandmechanismsofhumoralimmumtyinthesystemicin:fectionmodelofnewbomBALB/Cmicewithmu8、rinecytomegaloviIus(McMV)Ⅱ
7、医学院硕士学位论文治疗作用关键词新生小鼠;先天性MCMV感染;体液免疫;cpGODN2395;徐州医学院硕士学位论文————————一—————————————————————————————————————一——TheeffectofCpGoDN2395tothenewbornmiceinfectedbyobjectiveMCMVonimmuneAbstractTbexplorethee丘bctsandmechanismsofhumoralimmumtyinthesystemicin:fectionmodelofnewbomBALB/Cmicewithmu
8、rinecytomegaloviIus(McMV)Ⅱ
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