肿瘤相关性巨噬细胞在胃癌进展中的作用及相关机制研究

《肿瘤相关性巨噬细胞在胃癌进展中的作用及相关机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、复旦大学博士学位论文肿瘤相关性巨噬细胞在胃癌进展中的作用及相关机制研究姓名：束平申请学位级别：博士专业：外科学指导教师：秦新裕2012-04-02中文摘要肿瘤相关性巨噬细胞在胃癌进展中的作用及相关机制研究随着人们对肿瘤的研究深入，肿瘤的微环境(micro—environment)在肿瘤复发转移中的作用越来越受到重视。研究发现，在肿瘤的微环境中，有多种免疫细胞募集，并参与了肿瘤免疫，包括巨噬细胞。存在于肿瘤微环境中的巨噬细胞，被称为肿瘤相关性巨噬细胞(Tumor-associatedmacrophages，TAMs)。巨噬细胞具有可塑性，在不同的环境中，

2、可以分化为不同的亚群，如M1，M2，其在免疫功能上存在显著差异【1—3]。M1通过经典的激活途径，即通过Toll—like受体(TLRs)与抗原结合后，产生IL．12。IL．12使幼稚的T细胞向I型辅助性T细胞(Thl)分化，并使T细胞及NK细胞产生释放IFN—Y。IFN-y作为第二信号，可进一步激活巨噬细胞并增强巨噬细胞分泌细胞因子及抗原递呈的能力，同时分泌大量促炎因子，具有促进免疫的作用。M2则通过非经典途径激活，具体机制现在仍不清楚。其激活的巨噬细胞分泌的细胞因子具有炎症抑制作用，主要为IL一10，TGF．B等[4，51。肿瘤对各种浸润的炎性细胞

3、，具有诱导分化作用(re—education)，表现出特定的免疫细胞亚型。在对TAMs的研究发现，其大部分表现为M2亚型，具有与M2相似的分子标记(molecularmarker)及细胞因子谱(cytokineprofile)[6】。常用的TAMs分子标记如CDl6315，7，8】，CD20619一11]及CD204[12，13]等。TAMs对肿瘤的作用目前仍存在争议。一部分研究发现，TAMs具有抗肿瘤作用(anti．tumor)，而多数研究则认为，TAMs可促进肿瘤的侵袭、转移以及促进肿瘤血管新生等，从而促进肿瘤进展(pro—tumor)[14—16

4、】。胃癌是我国最为常见的肿瘤之一，但目前对于胃癌的微环境中的TAMs相关研究较少。本研究通过收集临床手术病例及标本，制作组织芯片，用免疫组化的方法，以CDl63作为TAMs标记，观察胃癌组织中TAMs的浸润情况，研究其与肿瘤的病理分化、临床分期以及预后的关系，以分析其对胃癌进展的作用。上皮间质化(Epithelial．mesenchymaltransition，EMT)是在组织胚胎发育中对形态形成起关键作用的过程。在EMT过程中，上皮细胞失去细胞问的紧密连接及细胞极性，形成具有间质细胞特征的梭形细胞[171。近年来研究发现，肿瘤的EMT效应是肿瘤进展的

5、重要机制，并受到肿瘤微环境的调控[18，19】。肿瘤细胞发生EMT反应后，细胞形态出现间质化，并且迁移侵袭能力将明碌增强。TAMs是肿瘤微环境的重要组成部分，而TAMs对肿瘤的EMT效应研究较少。因此我中文摘要们通过实验分析TAMs对胃癌的EMT效应，以进一步探讨其对胃癌进展的相关机制。第一部分肿瘤相关巨噬细胞对胃癌根治术后患者生存的影响本部分研究主要是探讨肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associatedmacrophages，TAMs)在胃癌组织中的浸润情况以及其与胃癌患者的临床及病理指标之间的关系，分析其对行根治术后胃癌患者的预后影响。收集135

6、例于1999年2月_2005年12月期问在本院普外科胃癌组行D2根治术、达到R0切除的胃腺癌患者病例资料，并将手术切除标本制作组织芯片。通过免疫组化染色，以CDl63标记TAMs，通过电脑图像分析系统及图像分析软件，计数阳性细胞个数及细胞密度。统计分析其浸润的细胞密度与患者的临床指标、胃癌的分化程度、以及病理分期的关系；并且进一步分析其对胃癌术后患者生存的影响。结果发现，胃癌组织中TAMs的细胞密度均明显高于正常胃壁组织，差异有统计学意义(p<0．001)；以胃癌组织中TAMs的细胞密度中位值(M=7．48)将胃癌患者分为高表达组(n=68)及低表达组

7、(n=67)，通过#检验分析发现胃癌组织中TAMs表达与淋巴结转移相关，高表达组淋巴结转移率较低表达组高，具有统计学意义(P_O．025)。TAMs表达与胃癌的T分期具有一定相关趋势，但无统计学意义，而胃癌患者的年龄、性别、肿瘤的大小及部位、细胞分化程度与胃癌组织TAMs的细胞密度均无相关性。通过COX单因素分析发现，胃癌患者的预后与胃癌的浸润深度、淋巴结转移以及胃癌组织中TAMs的细胞密度相关(尸=O．032)。通过Kaplan-Meier生存分析结果发现，胃癌组织中TAMs高表达组的总生存期(OS)短于TAMs低表达组(p=0．028)。TAMs高

8、表达组患者的一年、三年、五年的生存率分别是81％、69％、56％；而低表达组患者的一年、三年、