幽门螺杆菌对胃癌bgc-823细胞中bcl-xl基因表达的影响及作用

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1、江苏大学硕士学位论文幽门螺杆菌对胃癌BGC--823细胞中Bcl--xL基因表达的影响及作用姓名:孙海波申请学位级别:硕士专业:内科学指导教师:吴莺20120610江苏大学硕士学位论文摘要幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hpy/or/)与胃癌的关系密切。细胞毒素相关基因A蛋I兰t(cytotoxinasso—eiatedgeneA,CagA)是H∥肠一重要的毒力因子之一。依据CagA基因型的不同,H.pylorin-叮分为东亚型和西方型菌株。研究显示,东亚型菌株的毒力强于西方型菌株。Bcl.xL是一种凋亡抑制基因,研究显示,Bcl.xL基因在肿瘤的发生发展

2、中扮演着重要的作用。目的:研究东亚型和西方型Hpylori束1]激人胃癌细胞BGC一823后,对细胞中凋亡抑制基因Bcl.xL表达的影响。以此阐明东西方菌株之间的毒力差异和致病力的差异,以及影响菌株毒力差异的可能的机制,并探讨Bcl.xL基因在胃癌BGC.823细胞增殖中所起的作用。方法:1.分别用东亚型,西方型Hpy/or/菌株超声裂解液刺激胃癌细胞BGC-823,MTT法分析刺激后胃癌BGC-823细胞增殖情况。2.荧光定量PCR(RT.PCR)检测胃癌细胞BGC.823凋亡抑制基因Bcl.xLmRNA表达水平。3.设计特异的Bcl.xLshRNA转染胃癌BGC.823

3、细胞,沉默Bcl.xL基因的表达。4.MTT法分析Bcl.xLshRNA转染后的胃癌BGC.823细胞增殖抑制情况。结果:I江苏大学硕士学位论文1.Hpylori超声裂解液作用胃癌BGC-823细胞24h后,MTT显示细胞增殖。与对照组相比,东亚型处理组细胞增值率为29.7%(尸

4、NA水平上调了2.39倍(P

5、h和72h后,与对照组及Bcl.xLshRNA阴性组相比,BGC.823细胞的增殖抑制率分别为7.5%、24.7%、53%(P<0.01,P<0.01,P<0.01)。结论:1.Hpylori超声裂解液中的生物活性物质通过上调Bcl.xL基因的表达促进胃癌BGC·823细胞的增殖,并且东哑型H∥肠一比西方型Hpylori具有更强的生物活性。¨江苏大学硕士学位论文2.Bcl.xLshRNA可以下调胃癌BGC.823细胞中Bcl.xL基因表达,并抑制胃癌BGC.823细胞的增殖。关键词:幽门螺杆菌(Hpylori),幽门螺杆菌超声裂解液,细胞增殖,CagA蛋白分型,Bcl—xL

6、基因,Bcl—xL短发夹RNA江苏大学硕士学位论文ABSTRACTHelicobacterpylori㈣pytori)isoneoftheimportantriskfactorscausinggastriccanc%CytotoxicrelatedgeneAprotein(CagA)isoneofthemostimportantvirulencefactorsofHpylori.AccordingtothedifferentgenetypesofcagA,且pyloricanbedividedintotheEastAsiatypeandtheWesterntypestrai

7、ns,andresearchesshowedthatthetoxicityoftheEastAsiatypestrainobviouslyhigherthantheWesterntypestrain.Bcl-xL,animportantmemberofanti-apoptoticBcl-2family,playscriticalrolesintumorprogressionanddevelopmnt.Objective:TheexperimentwastostudytheinfluenceofH.pyloriont

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