骨痹合剂对去双前肢直立联合hulth法大鼠膝骨关节炎模型collagenii、mmp-13表达的影响

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1、骨痹舍剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨关节炎模型Collagen】I、蹦P一13表达的影响综述：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．-62攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯、74致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··974中文摘要骨痹合剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨关节炎模型CollagenⅡ、MMP一13表达的影响研究生：熊启良导师：王琦教授目的：建立一种与人类膝关节骨性关节炎发病过程相似的去双前肢直立联合Hulth法大

2、鼠膝骨性关节炎模型，在此模型成功的基础上，观察骨痹合剂对该模型CollagenⅡ、MMP．13表达的影响。方法：选择48只10天龄SD幼鼠，随机分为正常对照组、直立组、直立联合假Hulth组、直立联合Hulth组，每组12只。正常对照组不做任何处理，其余三组在腹腔麻醉下去除双前肢，手术后置于原母鼠饲养笼内继续原母乳饲养。直立联合假Hulth组在去双前肢术后四个月后行假Hulth手术；直立联合Hulth组在去双前肢术后四个月后行Hulth手术。在整个实验过程中，每隔一月分别测量每只大鼠的体重、体长、尾长、尾径、右下肢足趾长。四个组均在第二次手术后1个月，腹腔麻醉

3、下处死，从腹股沟处分别离断双下肢测量体积。取下四组的膝关节，通过固定、脱钙、脱水、包埋、切片、展片、烤片，行HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色及CollagenII、MMP．13免疫荧光检测。在模型成功的基础上，再选择52只10天龄SD幼鼠，在腹腔麻醉下行去双前肢术，术后置于原母鼠饲养笼内继续原母乳饲养，去双前肢后四个月行Hulth手术，在Hulth手术后1个月时随机分为空白对照组、骨痹合剂组、氨糖美辛组、生理盐水组，每组13只，每组随机处死3只，评价模型，在模型成功的基础上，骨痹合剂组按0．5mYl009体骨痹合剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨关节

4、炎模型CollagenII、MMP-13表达的影响重给予骨痹合剂灌胃；氨糖美辛组按2mg／1009体重给予氨糖美辛(溶于同体积的生理盐水里)灌胃；生理盐水组按O．5ml／1009体重给予生理盐水灌胃；空白对照组不做任何干预，连续灌胃给药4周后，麻醉处死各组大鼠，取下膝关节通过固定、脱钙、脱水、包埋、切片、展片、考片，行HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色及CollagenII、MMP．13免疫荧光检测。结果：正常对照组的关节软骨结构正常，软骨层次清晰，关节软骨看不到退变的改变；直立组和直立联合假Hulth组中关节软骨结构有部分破坏，软骨细胞表现较多，和聚集；直

5、立联合Hulth组中软骨结构破坏较严重，软骨层中可看到部分空洞，从中很难看到软骨的表层、移形层、放射层、钙化层和黏合线，关节软骨染色较不均匀，关节软骨出现了明显的退变表现。CollagenII免疫荧光显示：直立联合Hulth组CollagenII阳性细胞较其它三组低。MMP一13免疫荧光显示：直立联合jtulth组中的MMP—13阳性细胞比例较其它三组高。骨痹合剂组的软骨较其它三组比较，表层、移形层、放射层、钙化层和黏合线能看到部分，有部分关节软骨染色不均匀，表层细胞聚集，移形层的软骨细胞排列无序，见部分软骨细胞簇聚，软骨细胞增多，辐射层细胞柱状排列，潮线较完

6、整，钙化层可见肥大软骨细胞。CollagenII免疫荧光显示：骨痹合剂组阳性细胞比例较其它三组高：MMP一13免疫荧光显示：骨痹合剂组阳性细胞比例较其它三组低。结论：成功建立了去双前肢直立、去双前肢直立联合假Hulth、去双前肢直立联合Hulth三种模型，其中去双前肢直立联合Hulth模型膝关节退变更为典型，此模型制作简便，可重复性强，与人类直立状态膝骨性关节炎发病机制相似，可为进一步研究膝骨性关节炎发病机制及开发有效治疗措施奠定了基础。骨痹合剂可延缓去双前肢直立联合Hulth模型软骨退变状态，可通过上调细胞外基质CollagenII表达、下调MMP-13表达

7、，延缓膝骨性关节炎软骨的退变进程。关键词：膝骨性关节炎去双前肢直立联合Hulth大鼠模型骨痹合剂CollagenⅡMMP．13英文摘要GubimixtureeffectforCollagentypeII．MMP-13inthecutthedoubleforelegsinducetheratstoupjointHulthmethodmodleoftheKOAkneeosteoarthritismodelinratsQiliangXiong(SeieneeofChineseTraditionalMedicine)DirectedbyProfessorQiWangA

8、bstractObjective：to