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时间:2019-02-19
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1、细胞凋亡酶6在鸡肉成熟中的作用本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36第三章细胞凋亡酶6对鸡胸肉肌原纤维蛋白的降解作用⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。391.材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391.1实验材料与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391.1.1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391.1.2实验仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391.2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯401.2.1肌原纤维蛋白的提取与样品准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯401.2.2变性聚丙酰胺凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.401.2.3蛋白质印迹⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯402.结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.402.1不同孵育时间对伴肌球蛋白和伴肌动蛋白的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯402.2不同孵育时间对肌钙蛋白T的影响⋯⋯
3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.412.3不同孵育时间对肌间线蛋白的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423.讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯zIzl本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46全文结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49j《5【谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..51攻读学位期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53白的抑制作用和EGTA相当,但对伴肌动蛋白和肌钙蛋白T的抑制作用要小于EGTA。亮肽素和EGTA明显抑制了钙激活酶的活性,而VEID.CHO对钙激活酶几乎没有影响。从微观结构看,成熟14天的VEID.CHO处理组仍有较完整的Z线结构,而对照组Z线已经出现大面积的弱化。可见,钙激活酶在肉的成熟中确实起着重要作用,但细胞凋亡酶6也可能参与了肉的成熟过程。第二章细胞凋亡酶6对鸡胸肉肌原纤维蛋白的降解作用在离体条件下,用重组的细胞凋亡酶6孵
5、育从鸡胸肉中提取的肌原纤维蛋白,分别孵育1、3、5h后,通过电泳或免疫印迹技术对肉中与肉嫩度相关的骨架蛋白(伴肌球蛋白、伴肌动蛋白、肌间线蛋白、肌钙蛋白T)进行检测。结果表明:细胞凋亡酶6对肌钙蛋白T和伴肌动蛋白没有降解作用.在孵育的第3h,细胞凋亡酶6使伴肌球蛋白和肌间线蛋白发生了降解作用,但在笫5h,细胞凋亡酶6处理组和对照组的蛋白条带灰度又几乎持平,这可能是由于酶失活的缘故。关键词:成熟;细胞凋亡酶6;钙激活酶;亮肽素;EG,rA;●Theroleofcaspase一6inchickenagingABSTRACTOfalltlle砌butesofth
6、equal畸ofme她tendernessisratedaS也emostiIIlpommtbythecons啪er.Butcompared诚mnavora11djuiciIless,廿1ereismuchVariationiIltendenlcss蛐ga咖gtime.Therefore,t11ereseaLrchonmechallismofagingisofgreatsigIlific觚Cconimprovingmeattendenless.T11ispaperhasaresearchonther01eofc钺’paSe-6i11Ⅱlecourseofa百
7、ngontheconditionofm血lralagingand试vitro,respectiVely.Chapter1ef托ctofⅦID-CHO,leupeptionandEGTAonthedegradationofmy06brmarproteinsduringchickenpostⅡIortemagingoIlmeconditionofnan删aging,mckenbreastwere仃eated、Ⅳim讪ibitorofcaspaSe-6(Ac—VEID-CHO),leupe砸on纽IdEGTA.鲥teragedforl,3,7and14d,res
8、pectively,thedegradationofcytoske
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