耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究和pvl基因检测

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时间:2019-02-17

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1、温州医学院硕士学位论文耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究和PVL基因检测姓名:姜爱英申请学位级别:硕士专业:临床检验诊断学指导教师:包其郁2012-12温州医学院硕士学位论文耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究和PVL基因检测摘要目的:探讨临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学特征(包括mecA基因检测、SCCmec元件分型和MLST分型);对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行PVL基因的检测。初步了解本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学性特征,从而进一步指导临床治疗MRSA引起的感染,给临床用药提供一定的指导,预防和减少耐药株的出现。方法:采用K—

2、B法对临床分离的90株金黄色葡萄球菌进行抗菌药物敏感性分析;采用PCR方法对所有金黄色葡萄球菌进行mecA基因检测,确定MRSA菌株;采用多重PCR方法对MRSA进行SCCmec元件分型;对MRSA的七个管家基因进行PCR扩增、测序和比对,确定序列型(ST);采用PCR方法对MRSA进行PVL基因的检测。结果:1临床分离的金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、利福平、呋喃妥英和奎奴普丁/达福普丁均敏感;对青霉素、红霉素和庆大霉素的耐药率比较高,分别是93.3%,57.8%和33.3%;对夫西地酸中介耐药率为2.2%。MRSA的耐药率高于金黄色葡萄球菌和MSSA,其中对苯唑西林、红霉

3、素,庆大霉素、克林霉素、诺氟沙星和左氧氟沙星的耐药率显著高于金黄色葡萄球菌和MSSA,分别是83.3%,83.3%,58.3,54.2%,50.O%和37.3%:MRSA对夫西地酸的中介耐药率为8.3%。MRSA多为多重耐药,多对三种以上的抗菌药物耐药。2在90株临床分离的金黄色葡萄球菌中,mecA的检出率为26.7%。mecA基因阳性的金黄色葡萄球菌被确定为MRSA。3在24株MRSA中,有23株携带的SCCmec元件为SCCmecIII型,占95.8%,只有一株携带SCCmecI型。424株MRSA共检测出五种序列型(ST),分别是STl(8株)、ST5(5株)、ST7(1株

4、)、ST59(1株)、ST239(6株)、ST585(2株)和ST965(1株)。524株MRSA中,有1株检测到PVL基因,检出率为4.1%。结论:1在宁波宁海地区分离的金黄色葡萄球菌的耐药率较高,且MRSA的耐药率明显高于MSSA和金黄色葡萄球菌。部分细菌对夫西地酸中介耐药。MRSA表现温州医学院硕士学位论文出多重耐药性。2本地区MRSA的分离率较其他地区低。3本地区的MRSA携带的SCCmec元件以SCCmeclII为主;MLST分型以STl、ST5和ST239为主。4l株携带PVL基因的MRSA是SCCmeclII—ST239。关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因

5、金黄色葡萄球菌染色体mec盒多位点序列分型杀白细胞毒素基因温州医学院硕士学位论文MolecularEpidemiologicalCharacterizationandPanton.ValentineLeukocidin(PVL)GeneDetectionofMethicillin.resistantStaphylococcusaureusAbstractObjectives:ToinvestigatethemolecularepidemiologicalcharacterizationofMRSAfromtheclinical:mecAgenedetection,SCCmeety

6、pingandmultilocussequencetyping;todetectthePVLgeneofMRSAfromtheclinical.ThatwecanhaveapreliminaryunderstandingofthelocalmolecularepidemiologiccharacteristicsofMRSA,whichcanguidetheclinicaltreatmentofMRSAinfections,guidetheuseofantibiotics,preventandreducetheemergenceofdrugresistantstrains.Met

7、hods:Atotalof90clinicalstainsofStaphylococcusaureuswereusedinthisstudy.AntimicrobialsusceptibilitytestswereperformedbyK-Bmethod.ThemecAgeneweredetectedbyPCRtoestablishtheMRSA.SCCmectypingwasperformedbymulti-PCR.multilocussequencetypingwascarr

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