不同来源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力基因的研究

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1、温州医学院硕士学位论文不同来源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力基因的研究姓名：陆军申请学位级别：硕士专业：临床检验诊断学指导教师：李向阳2012-05-19温州医学院硕士学位论文不同来源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力基因的研究中文摘要目的：1．对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin—resistancestapbylococcusaureus，MRSA)进行感染状况和耐药情况分析。2．对临床分离MRSA菌株进行分子流行病学监测，探讨院内MRSA的流行趋势。3．明确MRSA菌株耐药基因盒SCCmec的分型及分布特点。4．通过MRSA菌株、MSSA菌株毒力基因的检测，分析

2、比较不同来源金黄色葡萄球菌的毒力因子分布。方法：1．收集我院2009年1月至2011年6月临床标本分离的MRSA菌株60株，MSSA菌株54株；采用MicroscanWalkAway40进行菌株鉴定，分析其标本种类和科室的分布情况，并用1wHONET5．5分析统计耐药现状；同时对所有金黄色葡萄球菌进行药物敏感性分析。2．采用PFGE对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行分子分型。3．采用SCCmec分型技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行基因分型。4．采用聚合酶链反应(PCR)检测不同标本分离的金黄色葡萄球菌的尸汜、SE,H1a、脚6、口^fnb等毒力基因。结果：1．共收集60株MRSA菌株，

3、标本来源以痰液最多，分布在神经外科、普外科、小儿科、骨科等多个病区，其中17株认为是社区获得CA-MRSA，43株认为是医院获得HA—MRSA。所有菌株均对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因和奎奴普丁／达福普汀敏感，未出现耐药菌株。MSSA对抗菌药物的敏感率普遍高于MRSA。CA-MRSA对利福平和左旋氧氟沙星的敏感性明显高于HA-MRSA，而对氯霉素、复方新诺明的耐药率，CA—MRSA与HA—MRSA接近。2．临床分离MRSA菌株的PFGE分型较为分散，共分为13种型别，每种型别的菌株数分别为2株至6株不等，未出现大范围的院内流行克隆，有少量克隆菌株出现跨病区传播。收集的MRS

4、A菌株PFGE型别有逐年增多的趋势。3．MRSA菌株的SCCmec分型以III型和Ⅳ型为主，其中III型全部为HA—MRSA菌株，Ⅳ型以CA-MRSA菌株居多。对利福平、氯霉素和左旋氧氟沙星的敏感率Ⅳ型MRSA菌株要高于Ⅲ型菌株。4．MRSA菌株中杀白细胞素基因PVL的检出率要显著大于MSSA，而黏附素凝聚因子基因口A、纤连蛋白结合蛋白基因励舱、肠毒素基因SEC．SEH的检出率都明显低于MSSA。在CA—MRSA温州医学院硕士学位论文和HA—MRSA之间检出率有显著性差异的毒力基因包括杀白细胞素基因PYLOn纤连蛋白结合蛋白基因FnbA，在CA-MRSA中的检出率要高于IlA-MRS

5、A。除励厶A外其它毒力基因在不同SCCmec分型中的分布没有显著差异。结论：1．本院收集临床分离MRSA菌株多重耐药性严重，其中CA—MRSA相对HA_MRSA敏感性稍高。2．所有金黄色葡萄球菌未出现糖肽类抗菌药物耐药。3．MRSA菌株的流行在院内有逐年增多的趋势，但未出现大范围的院内流行株，病区之间及病区内部出现了部分克隆传播，应加强院内感染流行控制。4．HA-MRSA菌株的SCCmec分型以Ⅲ型为主，一般呈多重耐药性，CA-MRSA菌株SCCmec分型以Ⅳ型为主，相对HA-MRSA敏感性较强。5．MSSA菌株毒力相对MRSA可能更高，而CA-MRSA相对HA—MRSA毒力也较强。

6、关键词耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；社区获得性；医院获得性；毒力因子：药物敏感性；葡萄球菌染色体mCC盒温州医学院硕士学位论文TheepidemiologicalsurveillanceandVirulencefactorsofMulti—-sourcesMethicillin-·resistantStaphylococcusaureusAbstractobjecfive1．Toinvestigatetheinfectionandresistancestatusofclinicalmethicillin—resistantstaphylococcusaureus(MRSA)．2．Toex

7、plorethedisseminationtrendofclinicalMRSAthroughmolecularepidemiologicalsurveillance．3．Tocompletethetypinganddistributingofstaphylococcuschromosomalcassettesmec(SCCmec)．4．ToanalysethedistributionofvirulencefactorsinclinicalMRSAandM