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时间:2018-10-24
《耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因多态性分型研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因多态性分型研究【摘要】目的探索一种准确、快速、可靠的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子生物学分型方法,了解医院内MRSA的多态性,为临床合理、有效地使用抗生素和控制耐药基因在种群间的传播提供帮助。方法用MecA基因相关高变区PCR扩增(HVR-PCR)和随机扩增多态性DNA(RAPD)两种方法,对MRSA菌株进行多态性分析。HVR-PCR检测MecA基因相关高变区正相重复序列元件(DRUs)的长度,根据DRUs数目的不同对MRSA分型;RAPD根据电泳图谱中条带的数目及位置,经NTSYS统计软件进行聚类分析,得到遗传树状图,按MRSA菌株之间的相关性进行分
2、型。结果应用HVR-PCR方法可将31株MRSA标本分为7型,分别含有7、8、9、10、11、12和16个DRUs,其中10DRUs型最多/[11/31(%)/],16DRUs型最少/[1/31(%)/];应用RAPD分型,31株MRSA共分10型,其中以IV型为主/[10/31(%)/],其他型分布比较接近。在11株HVR-PCR分型的10DRUs型中RAPDIV型4株/[4/11(%)/],RAPDII1型和RAPDIV型各2株/[2/11(%)/];10株RAPDIV型中9DRUs型、1ODRUs型各4株/[4/10(%)/]。结论RAPD方法和HVR-PCR方法对MRSA的分型率都比较
3、高,而且这两种方法都比较简单、稳定、可靠、快速,实用性强,具有广阔的应用前景。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因多态性分型研究【摘要】目的探索一种准确、快速、可靠的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子生物学分型方法,了解医院内MRSA的多态性,为临床合理、有效地使用抗生素和控制耐药基因在种群间的传播提供帮助。方法用MecA基因相关高变区PCR扩增(HVR-PCR)和随机扩增多态性DNA(RAPD)两种方法,对MRSA菌株进行多态性分析。HVR-PCR检测MecA基因相关高变区正相重复序列元件(DRUs)的长度,根据DRUs数目的不同对MRSA分型;RAPD根据电泳图谱中条带的数目及位置,经N
4、TSYS统计软件进行聚类分析,得到遗传树状图,按MRSA菌株之间的相关性进行分型。结果应用HVR-PCR方法可将31株MRSA标本分为7型,分别含有7、8、9、10、11、12和16个DRUs,其中10DRUs型最多/[11/31(%)/],16DRUs型最少/[1/31(%)/];应用RAPD分型,31株MRSA共分10型,其中以IV型为主/[10/31(%)/],其他型分布比较接近。在11株HVR-PCR分型的10DRUs型中RAPDIV型4株/[4/11(%)/],RAPDII1型和RAPDIV型各2株/[2/11(%)/];10株RAPDIV型中9DRUs型、1ODRUs型各4株/[4
5、/10(%)/]。结论RAPD方法和HVR-PCR方法对MRSA的分型率都比较高,而且这两种方法都比较简单、稳定、可靠、快速,实用性强,具有广阔的应用前景。【关键词】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;MecA基因;随机扩增多态性DNA:MecA基因相关高变区PCR扩增ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethepolymorphismsofmethicillin-resistantStaphylococcusaureus(MRSA)inlocalhospitalsinordertoprovideevidenceforclinicaldoctorstousetheantibiot
6、icsrationallyandanalyzedthepolymorphismsofMRSAwiththemethodsofPCRformec-associatedhypervariableregion(HVR-PCR)andrandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD).MRSAstrainstypedbyHVR-PCRaccordingtothelengthpolymorphismswhichdecidedbythenumberofdirectrepeatunitelements(DRUs)ofHVR-PCRproducts;GroupingofMRSAbyRAPD
7、wasbasedonthedependabilityamongdifferentMRSA31MRSAstrainstypedbyHVR-PCRweredividedinto7typeswhichcontained7,8,9,10,11,12andl6DRUs.MRSAstrainswithlODRUsweremostpredominant,presentinl1/3leases(%).Amongt
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