环氧化酶抑制剂对her-2高表达的人胃癌细胞nci-n87增殖和凋亡的影响

环氧化酶抑制剂对her-2高表达的人胃癌细胞nci-n87增殖和凋亡的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文环氧化酶抑制剂对Her--2高表达的人胃癌细胞NCI--N87增殖和凋亡的影响姓名:罗力亚申请学位级别:硕士专业:肿瘤学指导教师:刘风玲201203中文摘要环氧化酶抑制剂对Her.2高表达的人胃癌细胞NCI。N87增殖和凋亡的影响摘要目的:1探讨环氧化酶.2(COX.2)抑制剂对体外培养Her-2高表达的人胃癌细胞NCI-N87的抑制增殖及诱导凋亡影响。2初步探讨COX.2抑制剂下调Her.2蛋白表达机制。方法:1常规培养人胃癌细胞NCI.N87。2不同浓度的塞来昔布(ce

2、lecoxib)作用于人胃癌细胞NCI.N87,应用四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)比色法测定细胞光密度值(opticaldensity,OD),计算出生长抑制率。研究eeleeoxib对人胃癌细胞NCI-N87增殖的影响。3采用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测celecoxib对NCI-N87细胞周期分布及凋亡的影响。4采用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测MGC803、NCI-N87细胞的Her.2蛋白的表达情

3、况及celecoxib对NCI-N87细胞Her.2蛋白表达的影响。5采用细胞免疫组化法SP(streptavidin-perosidase)法检测NCI-N87的Her-2蛋白的表达情况及eeleeoxib对NCIoN87细胞Her-2蛋白表达的影响。结果:l不同浓度的celecoxib(10umol/l、20umol/l、40umol/1、80umol/l、100umol/1)作用NCI-N87细胞24h、48h、72h后可抑制细胞的增殖。在10umol/1.100umol/l浓度范围内随浓度

4、的增加,抑制作用逐渐增强,且随着celecoxib作用时间的延长,抑制作用也逐渐加强。与对照组相比差异具有统计学意义(P

5、与对照组相比具有统计学意义(P<0.01)。3不同浓度的celecoxib(20umol/1、40umol/1、80umol/1)作用于NCI-N87细胞48小时后,能使G1期细胞百分数明显上升,S期细胞百分数明显下降,使细胞周期停滞于G1期,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01),塞来昔布对人胃癌细胞NCI-N87G2期细胞百分比无明显影响,与对照组相比差异无统计学意义pO.05)。4不同浓度的celecoxib(20umol/1、40umol/l、80umol/1)作用于NCI-N87

6、细胞48小时后,可以下调Her-2蛋白的表达,且随着浓度的增加下调也增加,与对照组相比具有统计学意义(P

7、positivehuman2astriccancercellNCI..N87er-2/oosifivehnmangastnccell7-Objective:lToinvestigatetheeffectiveofcelecoxibonproliferationandapoptosisinHer-2/positivehumangastriccancercellNCI—N87invitro.2Toinvestigatethepreliminarymechanismofcyclooxygenaseinh

8、ibitorsdecreasedexpressionofHer-2protein.Methodes:lNCI-N87cellswereculturedroutinely.2HumangastriccancercellsNCI.N87wereincubatedwithdifferentC一一一一■一一‘—————一一。一oncentrationofcelecoxibmvitro.MTI"assaywereusedtotheintluenceofcelecoxibonprolifera

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