培美曲塞对肺腺癌a549细胞中skp2蛋白表达的影响及意义

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1、南昌大学硕士学位论文培美曲塞对肺腺癌A549细胞中SKP2蛋白表达的影响及意义姓名：万琴申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：王顺金201205摘要目的：探讨培美曲塞(PMX)对肺腺癌A549细胞中SKP2(S期激酶相关蛋白2)蛋白表达的影响及其意义。方法：本实验根据PMX浓度设一个空白对照组和四个实验组分别为：01ttM(A组)、0．019M(B组)、0．1p．M(C组)、1I．tM(D组)、101aM(E组)。采用MTT法检测不同浓度PMX处理24h、48h、72h后各组A549细胞的增殖抑制；利用流式细胞周期技术

2、分析不同浓度PMX处理48h后各组A549细胞周期分布；通过Westernblot法检测不同浓度PMX处理48h后各组A549细胞中SKP2蛋白表达。结果：PMX能明显抑制A549细胞增殖，以109M、72h作用后细胞抑制率(78．61±3．66)％最高(尸均<0．01)；与A组相比，C、D、E组S期细胞显著增多(P

3、相对表达水平显著增加(尸均<0．01)，且在一定的浓度范围内，随着PMX浓度增加其蛋白表达量也增加。结论：PMX能明显抑制A549细胞增殖且将其阻滞于S期，PMX处理后的A549细胞SKP2蛋白表达上调，这可能影响PMX对肺腺癌的化疗疗效。关键词：培美曲塞：A549细胞：SKP2AbstractABSTRACTobjective：Toexploretheinfluenceofs-phasel【inaseassociatedprotein2(SKP2)expressionanditssignificanceinlungad

4、enocarcinomaA549cellsafterthetreatmentofPemetrexed(PMX)．Methods：AccordingtotheconcentrationofPMX，wesetonecontrolgroupandfourexperimentalgroups：OlaM(groupA)，0．01uM(groupB)，O．1laM(groupC)，1uM【groupD)，10pM(groupE)．ThegrowthofA549cellshandledbydifferentconcentrationP

5、MXfor24h，48h，72h，wastestedbyMTTassay；TheeffectofdifferentconcentrationPMXhandlingfor48honthecellcyclephasedistributionofA549cellswasanalyzedbyflowcytometry；TheexpressionofSKP2proteinofA549cellshandledbydifferentconcentrationPMXfor48hwasdetectedbyWesternblot．Resul

6、ts：MTTassayshowedthatPMXcouldsignificantlyinhibitthegrowthofA549cells，andthehighestinhibitionratioWas(78．61±3．66)％attheconcentrationofIOIaMwhenA549cellswereculturedfor72h∽

7、ofs-phasecellswasincreasing、析ththeconcertrationofPMX．ThedifferenceofSKP2proteinexpressionamongeachgroupwassignificantly(P<0．01)，andcomparedwithcontrolgroupSKP2proteinexpressionsignificantlyincreasedinexperimentalgroups(P<0．01)．Thatincreasingwasobviouswiththeincre

8、asingofPMXincertainconcentrationrange．Conclusion：PMXcouldinhibitthegrowthofA549cellsandarrestedthemins—phase．TheexpressionofSKP2proteininPMX—treatedA549cellsWa