莪术油对肺腺癌a549细胞周期及组织蛋白酶k表达的影响

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1、莪术油对肺腺癌A549细胞周期及组织蛋白酶K表达的影响[基金项目]科技部国际合作项目（2008DFA31970）[作者简介]杨长福，（1980－），男，讲师，在读博士。研究方向：组织蛋白酶与肺纤维化。Email:yangchangfu@126.com[通讯作者]*牛建昭：教授，博导。研究方向：Email:niujianzhao@126.com杨长福1,2牛建昭*1王继峰1王晓波1黄春芳1唐炳华1赵丕文1刘霞1（1北京中医药大学细胞与生化实验室北京10029；2贵阳中医学院，贵州贵阳550002）摘要目的探讨莪术油对A5

2、49细胞增殖抑制作用及组织蛋白酶K表达的影响。方法MTT法观察莪术油对A549细胞增殖的抑制作用；流式细胞术检测细胞周期阻滞；Westernblot检测组织蛋白酶K的表达情况。结果莪术油作用后①MTT法结果显示莪术油在60mg·L-1~200mg·L-1范围内对A549细胞增殖有抑制作用，IC50随作用时间的延长显著前移。②流式细胞术结果出现凋亡峰，与未处理组细胞相比，给药组细胞G0/G1期细胞比例增加，S期细胞比例降低。③Westernblot结果显示，莪术油处理细胞24h后，组织蛋白酶K表达明显上调，100mg·L

3、-1达最大值。结论莪术油能抑制肺腺癌A549细胞增殖，阻滞细胞周期的作用，其机制可能与上调组织蛋白酶K表达水平有关。关键词莪术油；A549细胞；细胞周期；组织蛋白酶KEffectofZedoaryOilforCellCycleandCathepsinKExpressioninA549CellLineYANGChang-fu1,2,NiIUJian-zhao1,WANGJi-feng1,WANGXiao-bo1,HUANChun-fang1,TANGBing-hua1,ZHAOPi-wen1,LIUXia1(1.Labo

4、ratoryofCellandBiochemistryofBeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing10029,China;2.GuiYangCollegeofTraditionalChineseMedicine,GuiYang550002,China)AbstractObjectiveToexploretheZedoaryoilonA549celllineinhibitingtheproliferationandcathepsinKexpression.

5、MethodsTheeffectsofZedoaryoilontheproliferationoflungadenocarcinomacelllineA549weredeterminedbyMTTassay.Thecellscyclicretardationwereexaminedbyusingflowcytometry.CathepsinKexpressionoflevelweredetectedbyusingwesternblot.ResultsMTTshowedthatZedoaryoilhadaninhibit

6、oryeffectontheproliferationofA549cellsin60～200mg·L-1.FlowcytometryshowedthatZedoaryoilincreasedthepercentageofG0/G1phasecellsandreducedthepercentageofSphasecells.TheresultsofwesternblotshowedthattheexpressionofcathepsinKwasup-regulatedsignificanglyinA549cellsofZ

7、edoaryoilgroupscomparedwiththatincontrols.ConclusionZedoaryoilcansignificantlyinhibitthegrowthofA549cells，blockingthecellcycle.Theeffectsmayduetotheup-regulationofcathepsinK.KeywordsZedoaryoil;A549cell;cellcycle;cathepsink莪术油（OleumCurcumae）系莪术（温莪术）经水蒸气蒸馏提取的挥发油，属

8、于抗病毒药、抗癌药。化学成分主要有β-榄香烯、莪术醇、莪术二醇、莪术酮、吉玛酮等。研究表明，莪术油是一种有效的抗肿瘤药物，通过抑制肿瘤细胞增殖[1]、诱导细胞凋亡[2-4]及阻滞细胞周期[5]，与其它中药配伍使用能减少肺纤维化大鼠肺泡炎和纤维化情况[6-7]。本实验以A549细胞为材料，测定莪术挥发油对癌细胞的生长抑制率，检测莪术