两种含绿原酸植物的质量控制方法和绿原酸制备工艺研究

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1、河南大学硕士学位论文两种含绿原酸植物的质量控制方法和绿原酸制备工艺研究姓名：叶东旭申请学位级别：硕士专业：药物分析指导教师：李钦201205摘要中药指纹图谱是指将某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。它能较全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。本文在分析总结了杜仲叶及杜仲雄花的化学成分、药理作用的基础上，采用HPLC指纹图谱技术对杜仲雄株和杜仲雌株绿叶、杜仲雄花中3种主要的次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷进行了含量测定及成分积累规律的分析，旨在为

2、杜仲叶和杜仲雄花的质量控制和产业化提供必要的参考资料。同时，本文也分析总结了金银花的化学成分和药理作用，并采用酸醇回流法从忍冬绿叶中提取绿原酸，用大孔吸附树脂和乙酸乙酯进行纯化，旨在研究获取高纯度绿原酸的提取纯化工艺，为绿原酸的工业化生产提供详实的资料。本文的研究成果如下：(1)建立了杜仲雄株绿叶和杜仲雌株绿叶的HPLC指纹图谱。色谱条件是：Ameritech(250mmx4．6mm，5ttm)色谱柱；以甲醇-0．05％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；柱温25℃，流速1．0mL／min：检测波长254nm；检测时间为60min。在此条件下，分别对杜仲雄株、杜

3、仲雌株绿叶的指纹图谱进行评价，生成对照指纹图谱，确定了19个共有特征峰，并对其中主要次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷进行了含量测定。得出杜仲雄株绿叶和杜仲雌株绿叶指纹图谱相似度高，所含化学成分类似，但具体含量有差异。(2)建立了杜仲雄花的HPLC指纹图谱。色谱条件是：Ameritech(250mmx4．6mm，59m)色谱柱；以甲醇一0．05％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱：柱温25℃，流速1．0mL／min；检测波长238nm：检测时间为70min。在此条件下，分别对不同采集日期的杜仲雄花的指纹图谱进行评价，生成对照指纹图谱，确定了22个共有特征峰

4、，并研究了次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷的含量积累规律，得出杜仲雄花的盛花期是兼顾质量和产量的最佳采摘期的结论。(3)建立了HPLC法测定忍冬花蕾、茎枝、绿叶、落叶中绿原酸含量的方法。色谱条件是：ThermoSyncronisCla(250minx4．6mm，51上m)色谱柱，柱温为25"C，流动相为甲醇一0．05％磷酸溶液(25：75)，流速1．0mL／min，检测波长327nm。忍冬不同部位绿原酸含量顺序为：花蕾>绿叶>茎枝>落叶。(4)用酸醇回流法确定绿原酸的最佳提取工艺：12倍量80％乙醇，PH=4，回流2次，每次2．5h为最佳提取工艺条

5、件。最佳的大孔吸附树脂型号为HPDl00和HPD826，将提取液经过2次大孔吸附树脂进行纯化。然后用PH=3的乙酸乙酯萃取6---8次，浓缩，重结晶，得到纯度为74．8％的绿原酸。关键词：指纹图谱，杜仲叶，杜仲雄花，次生代谢产物，绿原酸纯化UABSTRACTFingerprintreferstosomeChineseherbalmedicineortraditionalChinesemedicinepreparationsafterappropriatetreatment，theUSeofcertainanalyticaltoolsgetmarkedits

6、chemicalcharacteristicsofthechromatogramorspectra．ItcanreflectmorefullythetypeandquantityofthechemicalcompositionoftraditionalChinesemedicineanditspreparationcontained，andthusanoveralldescriptionandevaluationofthequalityofpharmaceuticals．Onthebaseofthetotalreviewofchemicalcomponen

7、tsandpharmacologyofEucommialeavesandmaleflowers，aHPLCfingerprinttechnologyisusedtOdeterminatecontentsofthreekindsofmainsecondarymetabolitesgeniposidesacid、chlorogenicacid、geniposidesinEucommiastaminiferousplant、Eucommiamaleplant、Eucommiamalefloweronthedeterminationandanalysisofcom

8、ponentaccumulation，itisnecessaryt