碘促进血管内皮细胞增殖机制的研究

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1、徐州医学院硕士学位论文碘促进血管内皮细胞增殖机制的研究姓名：李鹏飞申请学位级别：硕士专业：影像医学与核医学指导教师：祖茂衡；张庆桥2012-04徐州医学院硕士学位论文碘促进血管内皮细胞增殖机制的研究中文摘要目的研究碘(iodine)促进血管内皮细胞(vascularendothelialcells，VEC)增殖可能的分子机制。方法人脐静脉血管内皮细胞株EA．hy926常规培养于含10％胎牛血清的DMEM培养液中，在37℃、5％C02及饱和湿度培养箱中培养。第一部分丝裂原活化蛋白激酶激酶1(Mitogen—activatedProteinKinasel，MEKl)抑制剂PD9

2、8059对碘离子(Iodineion，I’)浓度为300pg／L环境中的VEC增殖影响实验分为正常对照组、PD98059组、PD98059+KI组、KI组，应用CCK．8试剂测定细胞增殖情况。第二部分不同浓度I_对EA．hy926细胞表达血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)．的影响1．免疫印迹法测定不同浓度I‘刺激后EA．hy926细胞的VEGF表达水平；2．半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定不同浓度l一刺激后EA．hy926细胞VEGFmRNA的表达变化；3．统计学分析。结果第一部分MEKl抑制剂PD98

3、059对300pg／LI‘环境中培养的VEC增殖的影响与正常对照组相比，I。组VEC的增殖率显著增高(PO．05)。这些结果表明：300pNLI。能够刺激VEC增殖，在含I。环境下抑制MEK能够抑制VEC增殖。第二部分不同浓度I。

4、刺激对VEC表达VEGF的影响1．免疫印迹检测结果显示不同浓度I。刺激EA．hy926细胞24h后，与iF常对照组比较，实验组．VEGF蛋白表达无上调(P>0．05)，各实验组问VEGF蛋白表达无差异(P>0．05)2．RT—PCR检测结果显示不l司浓度I一刺激EA．hy926细胞24h后，与正常对照组比较，实验组VEGFmRNA表达无上调(P>0．05)，各实验组问VEGFmRNA表达无差异(P>0．05)。结论30099／L的I。能够促进VEC增贿；MEKl抑制剂能够抑制I一对VEC增殖的促进作用；I一促进VEC增值与ERK信号通路激活有关；高浓度I’不促进VEC表达合

5、成VEGF。关键词碘；细胞增殖；丝裂原活化蛋白激酶激酶1；血管内皮生长因子；布加综合征徐州医学院硕士学位论文StudyofIodineinhibitedproliferationonvascularendothelialcellsAbstractobjectiveTostudythemechanismofiodineonproliferationactivityofvascularendothelialcells(VEC)．MethodsHumanumbilicalveinendothelialeelllineEA．hy926wasserial—subcultivatedi

6、ntheDMEMculturefluidincludingl0％FBS．intheincubatordemanding37oC，5％C02andsaturatedhumidity．PartI．Effectofmitogen—activatedproteinkinase1(MEKl)inhibitor(PD98059)onVECcultivatedwithiodineExperimentationweredividedintonormalgroup．PD98059group，PD98059+KIgroupandKIgroup．Cellproliferationwasevalu

7、atedwithCCK8．PartII．ExpressionofVEGFinEA．hy926cellsstimulatedwithdifferentconcentrationsofiodine1．ExpressionofVEGFinEA．hy926cellsstimulatedwithdifferentconcentrationsofI‘wasmeasuredbywesternblot．2．ExpressionofVEGFmRNAinEA．hy926cellsstimulatedwithdifferentconce