s-腺苷蛋氨酸对lx-2肝星状细胞增殖的影响及机制研究

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1、东南大学硕士学位论文S--腺苷蛋氨酸对LX--2肝星状细胞增殖的影响及机制研究姓名：李昱江申请学位级别：硕士专业：临床医学指导教师：诸葛宇征2012-05-31中文摘要S一腺苷蛋氨酸对LX-2肝星状细胞增殖的影响及机制的研究专业内科学硕士研究生李昱江导师诸葛宇征教授摘要目的：观察S．腺苷蛋氨酸(SAMe)对LX．2肝星状细胞株(HSC)增殖的影响，探讨S．腺苷蛋氨酸对转化生长因子131(TGF．p1)诱导的肝星状细胞TGF．131．Smad信号传导通路的影响。方法：体外培养人源LX．2．HSC，CCK．8实验检测SAMe对其增殖的影响，并选择其中3种有效浓度用于观察S一腺苷蛋氨酸对转

2、化生长因子131(TGF一131)诱导的肝星状细胞TGF．131．Smad信号传导通路的影响。实验共分5组，A组：空白组，B组：TGF．131组(浓度为10ng／m1)，C组：SAMe(2mmol／L)+TGF一131组(浓度为10ng／m1)，D组：SAMe(4mmol／L)+TGF．131组(浓度为10ng／m1)，E组：SAMe(8mmol／L)+TGF-131组(浓度为10ng／m1)。采用western．blot方法检测SAMe对TGF．131诱导的HSC表达I型胶原蛋白(COL一1)及TGF．131信号传导相关分子Smad3、Smad4的影响。结果：(1)CCK．8实验表

3、明lmMSAMe组同对照组之问比较，LX．2肝星状细胞增殖差异无统计学意义(P=-0．145)；其余各浓度组同对照组问的差异均存在统计学意义(P<0．05)，且不同浓度组之间的差异均有或近似有统计学意义。(2)Western．blot检测I型胶原蛋白结果表明，TGF一131组盟著增加了I型胶原蛋白的表达(P

4、组显著抑制了HSC细胞内Smad3的产生，且浓度越大抑制越明显。(4)Western．blot检测Smad4结果表明TGF—pl组显著增加了Smad4的表达(氏o．05)，加入SAMe组显著抑制了HSC细胞内Smad4的产生(除C组外，其余P

5、theproliferationofLX--2hepaticstellatecellsanditsintracellularsignalingBYLIYu-jiangSupervisedbyProf．ZHUGEYu—zhengAbstract0bjective：ToinvestigatetheeffectsofSAMeontheproliferationofLX-2hepaticstellatecells，andexploretheroleofS-AdenosylmethionineonTGF-131stimulatedsignaltransductioninLX-2hepatics

6、tellatecellsMethods：TheLX一2HSCswereculturedinvitro．HSCsweretreatedwithdifferentconcentrationofSAMetodetecttheproliferationbyCCK一8．Accordingtothetestresults，threedosageswereselectedforthenextexperiments．Cellsweredividedintofivegroups：A：thecontrolgroup，B：TGF-131group(10ng／m1)，C：SAMegroup(2mmol／L)

7、+TGF-131group(10ng／m1)，D：SAMegroup(4mmol／L)+TGF一131group(10ng／m1)，E：SAMegroup(8mmol／L)+TGF一131group(10ng／m1)．SAMeandTGF一131wereaddedtothecellsandculturedfor24h．TheexpressionsoftypeIcollagenandSmad3、Smad4weredetectedbywestern．blot．