ngal与mmp-9在卵巢上皮性癌中的表达及相关性研究

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1、郑州大学硕士学位论文NGAL与MMP--9在卵巢上皮性癌中的表达及相关性研究姓名：郭艳申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：苑中甫201204摘要NGAL和MMP．9在卵巢上皮性癌中的表达及相关性研究研究生郭艳导师苑中甫郑州大学第一附属医院妇产科河南郑州，450052摘要背景与目的卵巢癌是妇科常见的三大恶性肿瘤之一，近年来随着科技的不断进步，卵巢癌的检测方法已有了突飞猛进的改进，但由于卵巢位于盆腔深处，早期发病隐匿不易察觉，一旦出现症状往往已属于中晚期，患者常常丧失了最佳手术时机，故卵巢癌的死亡

2、率现居妇科各类肿瘤之首。找到与卵巢癌发生、发展关系密切的生物学指标，探纠其为何会导致卵巢癌发生、侵袭的内在作用机制，提高卵巢癌的早期诊断率，以找出遏制肿瘤复发、转移的良策迫在眉睫、至关重要。中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)是Kjeldsen等1993年研究中性粒细胞中基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9MMP．9)时发现的一种新蛋白【l】，是Lipoca!in家族的一个新成员。研究发现NGAL在炎症性疾病和多种H，，～^·～⋯㈨⋯Ⅵo·⋯o／^。／o⋯⋯～⋯⋯⋯

3、肿瘤中表达上调，是近年来医学领域的一个新热点。MMP．9可降解细胞外基质和基底膜并影响组织的重塑，从而促进肿瘤的侵袭和转移。此外，多项研究表明NGAL和MMP．9的功能密切相关。本实验通过半定量RT-PCR方法和ELISA法检测卵巢上皮性癌组织及血清中NGAL和MMP．9在卵巢癌中的表达情况，以了解_者与卵巢癌临床病理特征之间的关系，并探讨卵巢癌中NGAL与啪．9表达的相关性。摘要材料与方法l研究对象：选取2010年1月"-'2011年2月郑州大学第一附属医院收治入院的病人89例，按性质分为3组：其

4、中卵巢上皮性癌50例(浆液性癌3l例，黏液性癌19例，其中按国际妇产科联盟(FIGO)2000年临床分期标准分期：I～II期17例、Ⅲ～Ⅳ期33例，患者年龄38．72岁，中位年龄53．5岁)；良性上皮性卵巢肿瘤21例f浆液性囊腺瘤15例、黏液性囊腺瘤6例，患者年龄28．67岁，中位年龄48岁)；选择同期在我院妇产科因子宫肌瘤手术切除的18例患者的正常卵巢组织及血液标本作为对照(患者年龄43．6l岁，中位年龄47．5岁)。三组病例年龄无统计学差异(尸>0．05)。入选病例均排除其他肿瘤病史，术前均未接

5、受放、化疗，取材前均征得患者知情同意，术后均经病理科确诊。患者于术前抽取空腹静脉血4ml，置于未加抗凝剂试管，室温下静置30min，4"C下3000r／miIl离心15min，取上清置于EP管．80℃冰箱保存。术中切取卵巢部分组织在O．5h内迅速移入一80℃冰箱保存，用于提取mRNA做半定量RT-PCR。所有标本避免反复冻融。2试验方法：应用酶联免疫吸附法(ELISA)和半定量逆转录．聚合酶链反应法(RT-PCR)检测卵巢上皮性癌、良性上皮性卵巢肿瘤、正常卵巢的组织及血清标本中NGAL和MMP．9基

6、因的表达情况。3统计学分析：采用SPSS17．0统计软件进行数据的处理与分析，对资料进行t检验、K-S检验和K．w检验，采用Pearson分析数据相关性。a=0．05为检验水准。结果lRT-PCR结果：卵巢上皮性癌组织NGALmRNA和MMP．9mRNA表达水平分别为(O．747±0．146，0．62510．144)，两者均显著高于在卵巢良性肿瘤组织中的表达(0．442±0．155，0．312±0．064)及卵巢正常组织中的表达(0．121±0．037，O．1l1±0．042)，差异均有统计学意义(

7、尸均<0．05)。I～II期卵巢癌患者组织中二者的表达水平分别为(0．684+--0．179，0．528±0．136)，与Ⅲ～Ⅳ期患者(0．779±0．116，0．676±0．124)相比差异均有统计学意义湫0．05)。NGALmRNA和MMP一9mRNA在有淋巴结转移组的表达分别为(0．80610．073，0．699±O．109)，在无淋巴结转移组的表达分别为(O．678±O．179，0．539±0．132)，差异有统计学意义妒均<0．05)。NGALmRNA在高、中、低分化癌中的表达分别为(0．

8、824±0．065，0．770±0．064，0．620±0．221)，差异有统计学意义伊均<0．05)，II摘要MMP．9mRNA则在高、中、低分化癌中的表达分别为(0．505±0．142，0．635±O．111，0．715___0．120)，差异有统计学意义(尸均<0．05)。2ELISA结果：卵巢上皮性癌患者血清中NGAL和MMP一9水平分别为(44．799±8．723，39．925±7．455)ng／rra，两者均显著高于在卵巢良性肿瘤患者血清中的水平(31．9