hpv及高危亚型与卵巢上皮癌发病的相关性研究

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1、硕士学位论文HPV及高危亚型与卵巢上皮癌发病的相关性研究学科专业免疫学学位类型科学学位□专业学位研究生姓名李一平导师姓名、职称张冉教授论文编号湖南师范大学学位评定委员会办公室二〇一五年五月分类号密级学校代码10542学号201202191490HPV及高危亚型与卵巢上皮癌发病的相关性研究StudiesonthecorrelationbetweenHPVanditshigh-risksubtypesandtheincidenceofovarianepithelialcancer研究生姓名李一平指导教师姓名、职称张冉教授学科专业免疫学研究方向临床免疫学及检验湖南师范大学学位评定委员会

2、办公室二〇一五年五月湖南师范大学学位论文原创性声明：本人郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中从明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者签名’曰：寺乎如年女月＾湖南师范大学学位论义版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属湖南师范大学。同意学校保留并向国家有关部口或机拘送

3、交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借閑。本人授权湖南师范大学可从将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影、印、缩印或担描等复制手段保存和汇编本学位论文。＿－作者签名：４平日期：７Ｖ醉１月＞１（日■＇ｗｒ＇导师签養：日期：年Ｓ月日摘要目的：探讨HPV感染以及其高危亚型HPV16和HPV35与卵巢上皮癌发病情况之间的关联性，寻找卵巢上皮癌发病的相关因素，为卵巢上皮癌的预防提供客观依据。方法：运用PCR技术扩增从甲醛固定石蜡包埋组织中提取的DNA：（1）提取石蜡包埋的卵巢组织DNA：625例石蜡组织标本分为正常卵巢组、良性肿瘤组和癌

4、变卵巢三组：经二甲苯脱蜡，使用DNA提取试剂提取出组织DNA。（2）运用PCR技术检测HPV的感染率：①将提取的DNA作为模板，用扩增目的片段（450bp）的引物PGMY09/11进行初步扩增；②选取第一步中PGMY扩增结果为阴性的产物作为模板，用扩增的目片段较短（150bp）的引物GP5+/6+进行第二次扩增。（3）亚型选择：将PGMY和GP5+/6+扩增结果为阳性的标本，再应用PCR技术从中筛选出高危型HPV16和HPV35，观察高危亚型16和35各占比值。结果：（1）从石蜡包埋组织中提取出DNA。（2）成功建立了HPV的巢式PCR和降落PCR扩增体系。（3）在癌变卵巢组织中H

5、PV的阳性检出率显著高于正常对照组和良性肿瘤组，同时良性肿瘤组的阳性检出率也高于正常对照组，44.32%的标本（95%CI=40.48-48.22%）使用PGMY09/11和GP5+/6+两对引物的巢式PCR扩增结果呈阳性，癌变组中63.35%（95%CI=58.95-68.65%）的样本PCR扩增结果呈阳性，正常组织和卵巢良性肿瘤组织中扩增结果阳性分别占有17.64%（95%CI=12.43-22.87%）和37.37%（95%CI=29.38-I45.42%），各组的阳性率差异有统计意义（P<0.005P<0.005）。（4）对HPV阳性组织中的HPV16和HPV35两种高危亚

6、型进行检测，癌变组HPV16占较大比值，共有53.97%（95%CI=45.78-61.8%）为HPV16，与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.005）。HPV阳性标本中仅3.97%（95%CI=1.68-6.26%）为HPV35，癌变组与正常组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：我们认为卵巢上皮癌的发生发展可能与HPV感染相关。高危亚型HPV16可能对卵巢组织具有较强的致癌作用，HPV35也可能在卵巢癌的形成中起到一定作用。关键词：甲醛固定石蜡包埋组织；DNA；PCR；高危亚型；HPV感染IIAbstractObject：Toexplorethecorrelatio

7、nbetweenethelialovariancancerandHPVinfection,especiallyhighdangroussubtypesHPV16andHPV35.ThuswecanpovideobjectivedataforthepreventionofepithelialovariancancerinHunanprovince.Method：625paraffintissuespecimenswereenrolledinthestudyanddivi