bmscs移植与电针联合应用对脑出血大鼠局部血流调节因子和jnk信号通路的影响

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1、中图分类号：硕士学位论文BMSCs移植与电针联合应用对脑出血大鼠局部血流调节因子和JNK信号通路的影响院（系）、所基础医学院研究生姓名王玉波学科、专业人体解剖与组织胚胎学导师姓名肖洪文教授二Ο一二年四月0目录1BMSCs移植与电针联合应用对脑出血大鼠局部血流调节因子和JNK信号通路的影响…………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………21.2英文摘要………………………………………………………51.3前言……………………………………………………………91.

2、4材料与方法……………………………………………………121.5结果……………………………………………………………271.6讨论……………………………………………………………381.7结论……………………………………………………………421.8参考文献………………………………………………………431.9英汉缩略词对照表……………………………………………472致谢……………………………………………………………3JNK信号通路与脑出血损伤的关联性探讨…………………481BMSCs移植与电针联合应用对脑出血大

3、鼠局部血流调节因子和JNK信号通路的影响摘要目的:观察BMSCs移植联合电针应用对脑出血JNK信号通路中（p-JNK,MEK4,MEK7）在周围脑组织的表达，及局部血流调节因子（ET-1，CGEP）的表达，来探讨电针刺激能否激活JNK信号通路抑细胞凋亡，保护神经元，促进BMSCS的增殖，分化治疗脑出血的疗效。方法：将-80℃冷冻保存的BMSCs复苏,培养，床代、诱导后通过脑立体定位仪采用胶原酶和肝素（2：1）比例混合3微升，注入尾状核。不同时间点进行NSS神评分,并随机分为：Control组、BMSC

4、s组、EaBMSCs组和单纯Ea组四大组。在术后第3天时通过脑立体定位仪，原孔道将20l0.9%生理盐水和20l细胞悬液移植入大鼠病灶中。五个亚组在1d、3d、5d、7d、14d，给予响应时间点进行NSS评分。电针组于移植2h后，进行电针治疗，到处死。通过蛋WB检测各亚组不同时间点磷酸（基）-N端JNK激酶/应激激活的蛋白激酶，（Phospho-JNK/SAPK）、MEK4、MEK7和GAPDH的表达。在1d、3d、5d、7d、14d相应时间点，断头处死，SD大鼠，取病灶脑组织，匀浆，取上清，通过

5、放射免疫分析法测定脑组织ET一1和CGRP。结果:1.移植后，BMSCs组和Control组第5天时评分比较存在显著性差异，有统计学意义（P0.05）；EaBMSCs组和Control组相比较第3、5、7、17天有显著差异（P0.05），ICH大鼠改善神经功能缺失症状得到改善。2.各组p-JNK表达2天达高峰，7天时下2降；相同时间点，BMSCs组、EaBMSCs组、EA组明显低于ontroCl组蛋白表达，P0.05，差异有统计学意义；BMSCs组、EA组低于EaBMSCs组蛋白表达，P0.0

6、5，差异有统计学意义；BMSCs组、EA组蛋白表达无明显差异，P﹥0.05.无统计学意义，3.相同时间点，BMSCs组、EaBMSCs组、EA组MEK4蛋白低于ontroCl组蛋白表达，P0.05，差异有统计学意义；BMSCs组、EA组低于EaBMSCs组蛋白表达，P0.05，差异有统计学意义；4.相同时间点，BMSCs组、EaBMSCs组、EA组MEK7蛋白低于ontroCl组蛋白表达，P0.05，差异有统计学意义；BMSCs组、EA组低于EaBMSCs组蛋白表达，P0.05，差异有统计学意

7、义；5.MSCs组，EBaBMSCs组，EA组内皮素（ET-1）表达低于Control组，P0.05，有统计学意义；BMSCs组，EA组内皮素（ET-1）表达低于EABMSCs组，P0.05有统计学意义；6.MSCs组，EBaBMSCs组，EA组降钙素相关肽（CGRP）表达低于Control组，P0.05，有统计学意义；BMSCs组，EA组降钙素相关肽（CGRP）表达低于EABMSCs组，有统计学意义；结论：1.BMSCs移植激活ICH病灶周围组织JNK信号通路，从而抑制受损脑组织的凋亡，保护神

8、经元。2.电针刺激和BMSCs联合应用，较单纯BMSCs移植更容易激活JNK信号通路蛋白表达，抑制受损脑组织的凋亡，恢复大鼠神经缺失症状。3.联合移植能上调局部血流调节因子，ET-1和CGRP的表达。改善局部血流，利于ICH大鼠损伤脑组织的修复和促进外源性BMSCs的存活。关键词：脑出血;骨髓间充质干细胞;JNK信号通路;内皮素；3降钙素相关肽。4BMSCstransplantationwithacusectorjointapplicationofloc