电针协同bmscs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究

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1、中图分类号:R33;R332;R743.34硕士学位论文电针协同BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究院(系)、所医学基础研究中心研究生姓名汤华军学科、专业人体解剖与组织胚胎学导师姓名杨朝鲜教授二Ο一三年四月1目录1电针协同BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究………………………………………………………………11.1中文摘要……………………………………………………………21.2英文摘要……………………………………………………………41.3前言…………………………………………………………………81.4材料与方法……………

2、……………………………………………111.5结果…………………………………………………………………221.6讨论…………………………………………………………………361.7结论…………………………………………………………………481.8参考文献……………………………………………………………491.9英汉缩略词对照表…………………………………………………552致谢…………………………………………………………………563BMSCs移植治疗ICH的研究进展(综述)…………………………571电针协同BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的影响及机理研究摘要目的:

3、通过观察Morris水迷宫测试成绩,血清中乙酰胆碱酯酶(AchE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和海马突触素(SYP)、神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触后致密物-95(PSD-95)蛋白表达,探讨Ea协同BMSCs移植治疗对脑出血大鼠学习记忆能力的疗效及其可能的机制。方法:(1)将BMSCs复苏、扩增和诱导,收集细胞备用。(2)选用成年SD大鼠进行Morris水迷宫训练4天,每天进行4次训练,第5天进行学习记忆能力测试,筛选逃避潜伏期少于30秒的大鼠随机分为BMSCs组、Ea组、电Ea-BMSCs组、NS组、FO组和Normal

4、组。(3)前4组采用胶原酶及肝素混合液匀速推进尾壳核制备大鼠ICH模型,在术后第3天时分别通过移植BMSCs、电针刺激、移植BMSCs协同电针刺激和注射0.9%NS进行治疗,每组再分为1天、3天、5天、7天、14天五个亚组并给予对应喂养天数;选取“大椎”与“百会”二穴进行电针治疗,每天只行一次治疗。假手术组仅进针但不注入胶原酶和肝素,也不进行治疗;正常组不施加任何处理措施。(4)在相应时间点对各组实验大鼠进行Morris水迷宫测试,然后取材。(5)检测血清中AchE、SOD和MDA的含量,免疫组织化学检测SYP、GAP-43和PSD-95的表达。结果:(1)

5、造模型之前对各组实验大鼠进行水迷宫测试,各组间没有检测出统计学差异(P>0.05)。在脑出血治疗后水迷宫检测,反映学习记忆能力的指标随2时间延长而好转,在1d时Ea组成绩比其他组好(P0.05);在3、5、7、14d时,NS组成绩比其他治疗组差(3d时BMSCs组除外)(P0.05),Ea-BMSCs组成绩比Ea组和BMSCs组好(P0.05)。(2)脑出血各组AchE在1d时开始下降,14d时达最低值。NS组AchE含量在5、7、14d时比其他治疗组高(P0.05);Ea-BMSCs组AchE含量,在5d时比Ea组高(P0.05),在7、14d时

6、比Ea组和BMSCs组低(P0.05)。(3)脑出血各组血清SOD在1d时开始下降,在3d时达最低后快速上升,持续到14d达峰值。在3d时,Ea组SOD含量比其他治疗组高(P0.05)。NS组SOD含量在5、7、14d时比其他治疗组低(P0.05),Ea-BMSCs组SOD含量在7、14d时比Ea组和BMSCs组高(P0.05),BMSCs组SOD含量在5d时比Ea组低(P0.05)。(4)脑出血各组血清MDA含量在1d时开始上升,在3d时达峰值后下降,在14d时达最低值。在3d时,Ea组MDA含量比其他治疗组低(P0.05)。在5、7、14d时

7、,NS组MDA含量比其他治疗组高(P0.05),Ea-BMSCs组MDA含量比Ea组和BMSCs组低(P0.05)。(5)脑出血各组SYP、PSD-95表达在1d时开始上升,Ea-BMSCs组和BMSCs组持续增高到14d达峰值,Ea组和NS组上升到7d时达峰值,随后下降。脑出血各组GAP-43表达在1d时开始上升,7d时达峰值,随后下降。(6)在5、7、14d时,NS组SYP、GAP-43表达比其他治疗组低(P0.05),Ea-BMSCs组SYP、GAP-43表达比Ea组和BMSCs组高(P0.05)。(7)在3、5d时,Ea组PSD-95表达比其

8、他治疗组高(P0.05)。NS组PSD-95表达在

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