bcl-2shrna转染联合塞莱昔布对胃癌细胞株sgc-7901增殖的影响

《bcl-2shrna转染联合塞莱昔布对胃癌细胞株sgc-7901增殖的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、青岛大学硕士学位论文Bcl--2shRNA转染联合塞莱昔布对胃癌细胞株SGC--7901增殖的影响姓名：刘伟伟申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：沈方臻20120602BcI-2shRNA转染联合塞菜昔布对胃癌细胞株SGC一7901增殖的影响摘要目的：研究以Bcl一2为靶标的小干扰RNA联合塞来昔布对胃癌SGC一7901细胞株增殖的影响。方法：利用筛选出的shRNA干扰Bci-2基因的靶序列，以脂质体2000为载体，将Bcl-2shRNA转染至人胃癌SGC-7901细胞中，将其与不同浓度的塞来昔布作用后，未转染的细胞作为对照。用MTT方法染色并计算出各实验组对SGC-7901细胞

2、的生长抑制率，流式细胞术检测各组细胞的凋亡率，ELISA方法分别检测联合组与药物组胃癌细胞SGC一7901Bcl-2蛋白的表达。结果：shRNA转染胃癌细胞株SGC-7901后，48h转染率达最高；MTT方法显示单药塞来昔布组的IC50为51．89+0．77um01／L，shRNA组细胞经塞来昔布作用后增殖抑制率明显升高，其IC50为18．18±4．12um01／L，P

3、进凋亡的作用。硕士研究生：刘伟伟(肿瘤学)导师：沈方臻教授关键词：BcI-2；小发夹RNA；RNA干扰；基因转染；塞来昔布EffectsoftransfectingBcl-2shRNAandcelecoxibontheSGC-7901celllineABSTRACTObjective：TheaimofthisstudywastostudythechangesofSGC一7901cellstransfectingsmallhairpinRNA(shRNA)targetedBcl-2andcelecoxibinvitro．Methods：TousetheeffectivesiRNAtar

4、getedtoBcl一2byLipofectamine2000，therateofcellgrowthinhibitionofallgroupswasdetectedbyMTrmethod，apoptosisratewasexaminedbyflowcytometryandtheexpressionofBcl一2wasassayedbyElisa．Results：AftersiRNAwastransfectedtoSGC-7901cells，therateofcellgrowthinhibitionwasincreased，thejointgroupwashigherbyflowcy

5、tometryandtheexpressionofBcl一2waslowerbyElisa．Conclusion：ThegrowthofSGC．7901cellswhichwastransfectedsiRNAhasbeeninhibited，andthesensitivitytocelecoxibhasbeenincreased．Postgraduatestudent：LiuWei-wei(Oncology)Directedbyprof．ShenFang·zheuKeywords：Bcl．2；smallhairpinRNA(shRNA)；RNAinterference(RNAi)；

6、genetransfected；celecoxib川3iiii■I⋯9Ⅲ7f㈣8㈣O⋯2洲Y引言Bcl-2基因在细胞的生长及凋亡中起着非常重要的作用，是一种抗凋亡基因，该基因的作用为保护细胞免于各种不同因素的刺激，如氧化剂、病毒等，这些因素可刺激细胞发生凋亡并对肿瘤耐药，因此，Bcl-2基因是具有多种生物学功能的一种基因。许多基础及临床实验研究表明Bcl-2蛋白升高可在多于1／2的肿瘤细胞中检测的到n】，因此在癌症的基因治疗领域，Bcl-2基因可选择为靶点之一。通过使Bcl-2基因阻断表达或Bcl一2基因的表达消减或下调等方法，可以使凋亡的肿瘤细胞比例增加，并能使该种细胞对不管是化疗

7、还是对放射治疗敏感性较前增加，从而达到减少肿瘤的发生或者以治疗肿瘤为目的的效果弛1，反义核苷酸技术在各种基础及临床试验的应用中已经相当成熟，它可用于针对Bcl一2的mRNA，该技术可以抑制Bcl-2的基因表达，尤其是在肿瘤细胞中，有逆转耐药作用，这种作用可使癌细的化疗敏感性增加口1。而这种技术是美国Genta公司首先开发的，现已经在许多基础研究中取得了可喜的成果，这些结果能充分显示在癌症的基因治疗领域中，Bcl一2基因作为重要的靶标具有良好的应用前景。RN