二甲双胍对pcos大鼠子宫内膜和卵巢irs-1、irs-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度影响

《二甲双胍对pcos大鼠子宫内膜和卵巢irs-1、irs-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中文摘要二甲双胍对PCOS大鼠子宫内膜和卵巢IRS-I、IRS-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响摘要目的：多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome，PCOS)是一种复杂的导致生殖功能障碍的内分泌失调性疾病，发病率占全球育龄女性5％～10％，主要表现为持续性不排卵，以高雄激素血症和高胰岛素．血．症为病理特征。Ovalle等人报道约50％～70％的PCOS患者，无论是否肥胖，均存在不同程度的探讨胰岛素抵抗(insulinresistance，IR)，但其机制尚不清楚，在人体中很难进行对照研究。本研究旨在比较IRS．1、IRS一2蛋白

2、表达及酪氨酸磷酸化程度在PCOS大鼠与正常大鼠的异同：研究二甲双胍对于PCOS大鼠子宫内膜和卵巢IRS．1、IRS．2的蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响；探讨二甲双胍改善PCOS大鼠子宫内膜和卵巢局部IR的发生机制，进而指导PCOS的临床治疗。方法：1实验动物及分组1．1实验动物：85日龄左右(体重180±109)健康清洁雌性SpraguDawley(SD)大鼠50只，购自河北医科大学动物中心，合格证编号：11l1063。(见Fig．1)1．2随机分组：空白对照组10只，模型对照组20只，二甲双胍组20121／、o2实验方法2．1动物模型制备：模型对照

3、组和二甲双胍组采用Poretsky法建立PCOS大鼠模型，每日颈背皮下注射3IU注射绒毛膜促性腺激素(humenchorionicgonadotrophichhormone，HCG)2次，第l天至第10天分别注射剂量递增的中效胰岛素，由O．5IU／天递增至6．0IU／天，以后每天固定剂量注射6．OIU，22天后检测大鼠血睾酮和胰岛素水平增高以及阴道涂』．；。持续出现角化细胞者符合PCOS模型。空白对照组同期皮下注射生理击垒水。中文摘要2．2药物干预实验：造模成功后每日分别给予空白对照组和模型对照组大鼠2ml蒸馏水灌胃，给予二甲双胍组大鼠二甲双胍3mg／

4、kg(按大鼠与人体重系数折算剂量)灌胃，1天1次，22天后放血将各组大鼠处死。3标本采集及测定3．1标本采集：抽取大鼠心脏血，分离血清，采用化学发光免疫法测定血清激素水平；打开大鼠腹腔，观察双侧卵巢和子宫的大体形态，分别测量三组大鼠卵巢湿重，取卵巢和子宫组织以10％多聚甲醛固定，石蜡包埋。(见Fig．2、Fig．3、Fig．4)3．2标本测定：光学显微镜观察HE染色子宫内膜及卵巢大体形态变化；免疫组织化学染色检测IRS．1和IRS．2在子宫内膜及卵巢的定位表达及酪氨酸磷酸化程度。结果：模型对照组和二甲双胍组大鼠在采用Poretsky法造模22天后检测血

5、睾酮和胰岛素水平增高以及阴道涂片持续出现角化细胞者为造模成功的PCOS大鼠，共计33只，造模成功率为82．5％。l激素水平的变化模型对照组T和INS水平较空白对照组明显增高(P

6、胍组(0．0641+0．0083)g。模型对照组大鼠卵巢湿重与空白对照组相比明显增加(P

7、卵泡内可见卵冠丘、卵泡液，颗粒细胞层数明显增多。(见Fig．5)4子宫内膜的形态学变化空白对照组大鼠子宫色泽鲜润；镜下可见子宫内膜腺体数量较多，腺腔大而多褶，呈簇状排列，腺上皮中可见分泌泡。模型对照组子宫略显充盈；镜下可见子宫内膜腺体数目明显减少，腺腔小而直，排列较分散。二甲双胍组子宫色泽较鲜润；镜下可见子宫内膜腺体数目增多，腺腔多小而直，部分可见到皱褶和分支，出现簇状排列。(见Fig．6)5免疫组织化学染色结果三组大鼠卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞和子宫内膜腺上皮细胞均见IRS．1、IRS．2及酪氨酸磷酸化的表达，呈黄色颗粒状。但具体表达强度明显不同，结果

8、如下：5．1子宫内膜组织IRS．1蛋白表达：空白对照组、模型对照组和二甲双胍组IRS．1灰度值