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时间:2019-05-14
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1、黑升麻对去卵巢大鼠子宫内膜及血清雌激素水平的影响作者:胡光民刘艳王海颖颜贵明胡建鹏申国明许浩【摘要】为正常对照组、去势对照组、黑升麻组、美雌醇组。除正常对照组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术,建立更年年期大鼠模型2周后,分别使用美雌醇和黑升麻灌胃干预处理4周,观察各组子宫重量和子宫指数的变化;采用HE染色法观察各组大鼠子宫内膜的变化;应用放射免疫分析法检测去卵巢大鼠血清雌二醇(E2)的水平。结果:黑升麻组与去势对照组相比,子宫重量无显著增加,子宫指数无明显变化,血清E2含量无明显差别(P>0.05);子宫内膜萎缩伴有不明显的单层柱状上皮增生。结论:黑升麻对去势大鼠子宫内膜的
2、增生没有刺激作用,同时没有增加去势大鼠子宫重量和子宫指数,对内源性雌激素的水平无影响。【关键词】更年期综合征黑升麻雌激素去卵巢子宫内膜9 女性进入更年期后,由于卵巢功能逐渐衰退和消失,雌激素水平明显降低,机体部分组织和器官就会发生退行性或代谢上的变化,出现神经、内分泌失调的症状,这些症状医学上命名为更年期综合征。黑升麻早在40年代初就已被欧美国家用来治疗高血压、经前期综合征以及更年期综合征等疾病,其提取物可有效缓解更年期潮热、烦躁等症状并可促进阴道上皮细胞的增殖和角化[1]。本实验通过雌性大鼠切除卵巢建立更年期模型,使用黑升麻提取物灌胃干预处理4周,观察黑升麻对去卵巢大鼠
3、子宫内膜及血清雌激素水平的影响,探讨临床应用黑升麻治疗更年期综合征无雌激素样刺激作用的安全性。1材料1.1动物SD成年雌性未孕大鼠40只,体重200~230g,购于安徽长临河医药科技有限公司。实验前置大鼠于室内适应环境1周,室温18~22℃。1.2主要药品和试剂黑升麻提取物(商品名:希明婷片)山东绿叶制药有限公司,国药准字Z20050748,批号:20060425;美雌醇Sigma-Aldrich;E2放射免疫分析试剂盒(北京北方生物研究所)批号:20050220。2方法2.1动物模型的建立[2]9SD成年雌性大鼠用10%的水合氯醛(0.35ml/100g)麻醉,腹正中线脐
4、下约2cm处,剪除毛发,切开皮肤和腹肌,打开腹腔,分离组织,找到Y型的子宫,在子宫和输卵管的末端视野中可见一乳白色发亮的脂肪团,分离脂肪团,便可见到粉红色的卵巢。先将一侧卵巢和输卵管用丝线结扎,再摘除卵巢。同法摘除另一侧卵巢。术后缝合创口,生理盐水2ml/只腹腔注射,庆大霉素2万单位/只,皮下注射,连续3天。2.2分组与给药40只SD成年雌性大鼠,随机分为正常对照组(N)、去势对照组(OVX)、黑升麻组(CR)、美雌醇组(E),每各10只,去势后饲养2周予药物处理。黑升麻组:希明婷片研成粉末用蒸馏水配制成1.32mg/ml悬混溶液[3];美雌醇组:美雌醇用Sesameoil
5、配制成0.1mg/ml的溶液。各组使用相应的药物5ml/mg/d灌胃,正常对照组和去势对照组灌服等量的蒸馏水,连续4周。2.3指标的观察及测定2.3.1血清E2的测定各组大鼠用10%的水合氯醛(0.35ml/100g)麻醉,腹主动脉取血2ml,离心机3000r20min取上清,-20℃贮存,送安徽医科大学第一附属医院核医学实验室检测,严格按放免试剂盒说明书操作。2.3.2子宫重量和子宫指数各组大鼠断头处死后,解剖取出完整的子宫,精确称量湿重,并按下面的公9式计算子宫指数。子宫指数(UMI)=子宫湿重(g)/体重(g)×100%2.3.3组织形态学观察①石蜡切片的制作:新鲜的
6、子宫中性甲醛固定5d后,截取Y型子宫交叉处上方段约1cm的子宫组织,常规脱水、浸蜡、包埋,切片厚度5μm。②HE染色:组织脱蜡,常规HE染色,充分水洗,酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,显微镜下观察各组大鼠子宫内膜形态学的变化。2.4数据统计学处理实验结果均采用均值±标准差(x±s)表示,各组间比较采用方差分析,统计结果用SPSSforwindows11.0软件分析。3结果3.1一般情况去势对照组与正常对照组相比,大鼠的饮食量明显增加,体重增加较快(P<0.05);美雌醇组与去势对照组相比,大鼠的饮食量减少,体重显著降低(P<0.01);黑升麻组与去势对照组相比,大鼠的饮
7、食量和体重无显著变化(P>0.05),见表1。表1各组大鼠体重的比较(注:与正常对照组相比,**P<0.01,*P<0.05;与去势对照组相比##P<0.01,#P<0.05。93.2各组大鼠子宫重量、子宫指数和血清E2含量的比较去势对照组与正常对照组相比,大鼠的子宫重量明显减小,子宫指数显著降低,大鼠血清中E2含量明显降低(P<0.01);经过4周的药物干预,美雌醇组与去势对照组相比,大鼠的子宫重量明显增加,子宫指数显著升高,血清E2含量明显升高(P<0.01);黑升麻组与去势对照组比较,大鼠的子宫重量无显著增加
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