egcg调控tgf-β1诱导头劲鳞癌细胞上皮-间质转化实验的研究

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1、硕士学位论文中文摘要EGCG调控TGF．pl诱导的头颈鳞癌细胞上皮．间质转化的实验研究摘要目的：头颈鳞癌是世界第六大常见恶性肿瘤，其患者的五年生存率近年来没有得到明显改善，主要在于肿瘤的早期转移，而TGF—p通路介导的上皮一间质转化(Epithelialmesenchymaltransition，EMT)在其间发挥了重要作用。表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocaechin．3一gallate，EGCG)是绿茶中茶多酚类的主要成分，其抗肿瘤作用涵盖肿瘤的生长、发展、侵袭、迁移等多个方面。研究表明，EGCG一方面能逆转肿瘤细胞EMT的发生，另一方面能通过Smad7调

2、控TGF．13通路。目前，关于EGCG对头颈鳞癌EMT影响的报道甚少。因此，本研究拟在头颈鳞癌体外实验中阐明EGCG能逆转TGF．p1刺激诱导的EMT，并初步探讨该过程中Smad7的变化。方法：(1)以5ng／mlTGF-pl刺激Tu686细胞，构建EMT模型：(2)在此模型中，用不同浓度(0、10、20、309M)的EG-CG刺激细胞24小时后，用RT-PCR和Western．Blot检测上皮细胞标志物E．cadherin和间质细胞标志物Vimentin的表达，同时检测TGF．D通路中Smad7的表达；(3)用浓度为209M的EGCG刺激细胞后，于不同的时间点(6、12

3、、24小时)收集细胞，检测E—cadherin及Vlmentin的表达；(4)用5ng／ml的TGF-131刺激Tu686细胞24小时后，再加入浓度为209M的EGCG处理24小时，观察这一过程中细胞形态及细胞间连接的变化。硕士学位论文中文摘要结果：(1)TGF一131刺激Tu686细胞后，EMT标志物E—cadherin的表达下调，而Vimentin的表达则增强，并且细胞形态发生相应改变，TGF-p1介导的Tu686细胞EMT模型构建成功；(2)在EMT模型中，EGCG能有效的抑制EMT的发生，且E．cadherin的表达上调及Vimentin的表达下降；(3)EGCG

4、能上调EMT模型中Smad7的mRNA及蛋白的水平。结论：(1)EGCG能抑制TGF一131介导的头颈鳞癌细胞株Tu686EMT的发生；(2)该抑制作用可能与TGF—p通路中抑制性因子Smad7的上调有关。关键词头颈鳞癌、转化生长因子一pl、上皮．间质转化、EGCG、Smad7ⅡEGCGregulatesTGF-pl—InducedEpithelialtoMesenchymalTransitioninSquamousCellCarcinomaoftheHeadandNeckABSTRACTObjective：Squamouscellcarcinomaofheadandne

5、ck(SCCHN)isthesixthmostcommoncancerintheworld，anditsfive．yearsurvivalrateforpatientsarenotimproving，mainlyduetotheearlyoccurrenceofcancermetastasis．Epithelial—mesenchymaltransition(EMT)isconsideredtobecloselyralatedtometastasisofSCCHN，andTGF．ppathwayplaysanimportantroleinthisprocess．EGCGa

6、majorcomponentofpolyphenolsingreentea,itsantitumoractivityinvolvesmanyaspects，includingtheinhibitionoftumorgrowth，progression，migration，invasion,andmetas．tasis，etc．Resultsshowthat，EGCGcallreversetheoccurrenceofEMTintumorcells，andregulateTGF一13mediatedpathwaythroughcontrollingwithSmad7．Cur

7、rently，therearefewreportsabouttheimpactiononhowregulatesEMTinSCCHN．Therefore，ourstudywillillustratethatCaninhibittheoccurrenceofEMTinSCCHN，andexplorethechangesofSmad7inthisprocess．Methods：(1)InordertodevelopEMTmodel，Tu686cellsweretreatedwith5ng／mlTGF-131；(2)Followin