中国原产华东葡萄及其子代抗白粉病基因cdna文库构建及est序列分析

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1、研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果是按学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》获得的，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并

2、表示了谢意。研究生签名：粜自罐展研于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。孙糨互破时间：肋揖∥月f日关于其他单位与人员对研究生学位论文使用授权的说明任何收存和保管本论文各种版本的单位和个人未经本论文作者的导师授权，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》有关规定处理并追究法律责任。经本论文

3、作者的导师同意，授权西北农林科技大学可向主管上级有关单位送交论文的纸质件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用复印、缩印或扫描等复制手段保存、；r-编学位论文；否则，按违背《中华人民共和国著作权法》有关规定处理并追究法律责任。研究生签名：／拄咱龋时间：夕砑年／月q-日抽签名：秀眨帆帅d月f日第一章文献综述1．1葡萄白粉病简述葡萄白粉病(Uncinulanecatot(Schw)．Burr．)是一种真菌病害，最早发现于北美洲。Schweinit于1834年首次在《Synopsisfungoruma

4、meric．bor．》一书中对这种病原菌进行了描述[13。由于美洲种葡萄对自粉病具有较强的抗性，所以在北美，人们早期对这种病害几乎没有多少研究报道。19世纪西欧引种北美葡萄，把起源美国的葡萄病虫带入欧洲，1845年英国最早发现葡萄自粉病印1．1850年以后，法国和欧洲其它所有欧洲葡萄(VitisviniferaL．)产区都出现了白粉病。在1850—1854年间，白粉病使欧洲葡萄造成严重的经济损失。此后，遍布世界各地的葡萄产区都遭到该病的危害，成为一种危害葡萄的世界性病害。1．1．1病原物病原物(Un

5、cinu]anecator(Schw．)Burr．)属真菌子囊菌亚门，自粉菌目，钩丝壳属，葡萄钩丝壳。菌丝表生，有吸器。闭囊壳散生，球形，黑褐色，直径80一100微米，基部有10—13根具有隔膜的附属丝。附属丝顶端无色，向一方卷曲，基部褐色，长度为闭囊壳直径的2—3倍，内有多个子囊。子囊椭圆形，无色，大d,50-60X25—35微米，内含4—6个子囊孢子．子囊孢子无色，单胞，大小20—25×10-12微米。无性态属半知菌亚门，葡萄粉孢(OidiumtuckeriBerk．)。分生孢子梗短。分生孢子串

6、生，无色，单胞，椭圆形或卵圆形，内含颗粒体，大小16．3-20．9×30．3-34．9微米口]。1．2．2葡萄白粉病的发病规律葡萄白粉病菌以菌丝在寄主的病组织内和芽内越冬。次年春天形成分生孢子，借风力传播至寄主表面，萌发后直接穿透表皮入侵，分生孢子发育的适宜温度为25—30。C，最低5oC，最高40。C，形成分生孢子的最适温度为29℃一30oc，在37—40℃的高温中分生孢子以及菌丝不能成活太久，但在--16．5。C的低温下并不影响生活力。分生孢子在0—100％相对湿度下均可萌发：在缺乏水墒的情况下

7、，也能萌发入侵。因此干旱的夏季和温暖闷热、多云的气候易引起病害的发生。病原菌的潜育期长短决定于温度，一般情况下为14一15天。高湿度的作用在于促成大量分生孢子的形成，使菌丝体发育良好。陕西关中6月下旬开始发病，7月中旬以后达到高峰H3。1．1．3葡萄白粉病的为害特点白粉病能够侵染葡萄的所有绿色部分，主要有叶片、枝条、花、果实等，但以幼嫩组织最易感病。叶片发病，叶色褪绿或呈灰白色斑块，上覆白粉，叶面不平，病斑轮廓不整齐，大小不等，严重时白粉布满叶片，逐渐使病叶卷缩、枯萎而脱落。幼果发病，2中国野生葡萄

8、抗白粉病基因eDNA文库构建及EST序列分析首先褪绿色斑块上出现黑色星芒状花斑。上覆盖一层白粉，病果不易增大，果形小而酸。果穗染病易枯萎脱落。果粒长大后感病，果面表现网线纹，病果易开裂。新梢、果梗及穗轴发病时，出现黑褐色网状线纹，上覆盖白色粉状物。树体感病后，不仅生理机能遭到破坏，而且造成严重的产量和经济损失，且葡萄浆果的品质被降低髓’6]。1．2中国野生葡萄及抗病性简述中国是世界葡萄属植物重要的起源地之一，起源于中国的葡萄属共有42种和7个变种，分布于我国24个省、