高蛋氨酸饮食对大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响

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1、氨基酸和生物资源2010，32(4)：50—54AminoAcids＆BioticResources高蛋氨酸饮食对大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响任晓丽，杨波，黄陈平，陈锡文h(1．温州医学院，实验动物中心；2．温州医学院，预防医学系浙江温州325035)摘要：目的：探讨高蛋氨酸饮食对大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食对照组(对照组)和高蛋氨酸饮食组(高蛋氨酸组)。对照组喂饲普通饲料，高蛋氨酸组大鼠喂饲含3％蛋氨酸的饲料，共8周。采用高效液相色谱法测定大鼠血浆同型半胱氨酸含量，以MDA、SOD、NO／ET和t—PA／P

2、AI平衡等指标建立研究平台和内皮功能评价体系，同时以扫描电镜观察主动脉弓血管内皮细胞形态。结果：与对照组相比，高蛋氨酸组血浆Hcy含量显著高于对照组，是对照组的2倍以上；血浆MDA和SOD活力显著升高(P<0．05)，t—PA／PAI—l和NO／ET比值均显著降低(P<0．05)。扫描电镜显示高蛋氨酸组大鼠内皮细胞呈典型虫蛀样损害，伴有附壁血栓形成和脂质沉积。结论：高蛋氨酸饮食可诱发大鼠高半胱氨酸血症，Hcy可通过氧化应激机制损伤血管内细胞分泌功能，血浆NO／ET和t—PA／PAI一1系统失衡。关键词：高半胱氨酸血症；血管内皮细胞；同型半胱氨酸；蛋氨酸中图

3、分类号：Q95文献标识码：A文章编号：1006—8376(2010)04—0050—05血管内皮细胞(vascularendothelialcell，VEC)氨酸血症和动脉粥样硬化及其血栓性并发症的发生是覆盖于心血管内腔表面的一层连续单层扁平细提供新的研究思路。胞。现已证明VEC是具有许多生理功能人体最大的自分泌、旁分泌和内分泌器官，可以合成和释放多1材料与方法种心血管活性因子，如一氧化氮(nitricoxide，NO)、1．1动物与分组内皮素(endothelin，ET)、组织纤溶酶原激活因子(t选用健康雄性8周龄Wistar大鼠20只，体重—PA)、组

4、织纤溶酶原激活抑制因子(PAI)和血栓素1554-5g，由中国科学院上海实验动物中心提供。A2(thromboxane，TXA2)等，从而调节并影响VEC在习服饲养后，随机分为2组：正常饮食对照(对照心血管疾病发生发展中的作用。生理状态下NO组)和高蛋氨酸饮食组(高蛋氨酸组)，每组l0只。介导血管平滑肌舒张与ET介导血管收缩平衡是调1．2建立高半胱氨酸血症大鼠模型控血管张力的主要系统，NO／ET失衡，诱发血管痉除对照组外，高蛋氨酸组大鼠喂饲3％高蛋氨挛，可能是动脉粥样硬化早期病变表现之一J。t—酸饲料饮食，持续8周，并分别记录各组大鼠日平均PA和PAI一1

5、共同参与调节凝血一纤溶平衡与内皮摄食总量。高蛋氨酸饲料由南京安立默实验动物饲损伤时的止血过程，t—PA／PAI—l失衡，机体纤料有限公司加工制作，L一蛋氨酸为上海斐雅科技溶功能紊乱和血小板聚集性增加，诱发血液呈高凝发展有限公司产品，批号为20040210，符合AJ192状态从而加速动脉粥样硬化斑块形成和血栓性疾病版产品质量标准规定。饲料在制成颗粒以前，将原的发生。因此NO／ET系统的抗血管痉挛与t—PA／料分为两部分，一部分直接加工成普通饲料，另一部PAI系统的抗高血凝状态形成连锁效应，两系统失分按3％的比例添加蛋氨酸，制成颗粒饲料。衡可能是介导血管内皮分

6、泌功能障碍促进动脉粥样1．3取样硬化及其血栓性并发症发生发展的重要原因之一。饲养8周后，各实验组禁食24h后，称重并依本研究通过对大鼠进行高蛋氨酸饮食干预，观察高次用2％戊巴比妥钠(50mg·kg)腹腔注射麻醉，蛋氨酸饮食对大鼠血浆t—PAZPAI一1和NO／ET平腹主动脉取血，部分注入质量分数3．8％枸橼酸钠衡状态的影响，探讨高蛋氨酸饮食干预后对大鼠血预置的抗凝试管中(V／V：1：9)；其余部分注入120管内皮细胞分泌功能及其形态变化，为预防高半胱L质量分数2％的EDTA—Na：的无菌抗凝试管中，全部血样置于冰浴中预防溶血，常规制备血浆，收稿日期：201

7、0—06—18一20％以下冰箱保存、待测。迅速打开胸腔，取下主作者简介：任晓丽，女(1981一)助理实验师，研究方向：实验动物与医学检验，Email：玎【l@wzmc．net动脉弓，剥离动脉附着组织，生理盐水清洗血迹，取通讯作者E—mail：chenxiwen@163．con主动脉弓下段1～2cm迅速投入预置2．5％戊二醛任晓丽等：高蛋氨酸饮食对大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响·51·溶液前固定。制物活性的测定1．4测试方法严格按照试剂盒说明书采用发色底物法测定，1．4．1大鼠日平均摄食总量试剂盒由上海捷门生物技术合作公司提供，产品批饲养期开始，各组大鼠给予

8、等量颗粒饲料D号分别为A21002和A22002。(共200g)，