银杏叶提取物对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位及视网膜组织中热休克蛋白表达影响

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1、目录洲IIIIIIIIIIIILIIIlllllIIIlY2582896中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文银杏叶提取物对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位及视网膜组织中热休克蛋白表达的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6月U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·13附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“23讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·19结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28综述银杏叶提取物与视神经视网膜疾病的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”41个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42中文摘要银杏叶提取物对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位及视网膜组织中热休克蛋白表达的影响摘要目的：视神经损伤是一种视力损伤严重、预后较差的视神经病变，其治疗方法少、治疗效果差。探求视神经损伤后修复再生的方法，谋求改善视神经功能的策略一直是眼科研究的热点，但目前尚缺乏安全、有效的治疗药物。越来越多的证据表明，银杏叶提取物(GinkgoBilobaextract，EGb761)具有抗氧化、抗缺血、保护线粒体、抑制一氧化氮合酶、抑制谷氨酸毒性以及抑制血小板活化因子等多种作用，且长期应用未发现其毒、副作用[1l，是一种有潜

4、力并且可以长期应用的视功能保护剂。本研究通过建立大鼠视神经不完全损伤模型，腹腔注射银杏叶提取物，来观察视神经损伤后，银杏叶提取物对视网膜神经节细胞(retinalganglioncell，RGCs)线粒体跨膜电位(mitochondrialtransmembranepotentials，／Xvrn)变化及视网膜组织中热休克蛋白(heatshockproteins，HSPs)27表达的影响，从而探讨银杏叶提取物对外伤性视神经损伤的作用，进而为银杏叶提取物临床治疗视神经损伤提供理论基础和实验依据。方法：清洁级健康SD大鼠60只，雌雄不限，体重2509

5、士109。常规眼部检查无眼疾。随机分为3组，正常对照组(正常组)20只(20眼)，实验对照组(对照组)20只(20眼)，实验治疗组(治疗组)20只(20眼)。正常组不做任何处理。对照组和治疗组建立左眼视神经损伤模型，造模后1小时开始，治疗组给予0．35％银杏叶提取物(1OOmg／kg)，生理盐水配置腹腔注射【2，3】，对照组给予同治疗组体积的生理盐水直接腹腔注射，此后每日一次，至试验结束。于实验3d、7d、14d、28d，每组各取5眼的动物视网膜组织，用HE染色观察各组视网膜组织形态学的改变、免疫组织化学染色观察热休克蛋白27的表达情况、流式细胞

6、术测定视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位的变化。研究中计量资料均以均数4-标准差(叉±S))表示，采用方差分析，计数资料采用f检验，应用SPSSl3．0统计软件包进行分析，以P

7、均较对照组的3d、7d、14d、28d时间点损伤情况轻，其中14d损伤的情况明显明显轻于3d、7d和28d。2热休克蛋白27免疫组织化学染色：HSPs27的表达可位于视网膜神经纤维层，其强阳性表达呈棕色。正常组实验中所见呈现弱阳性表达浅黄色染色，各个时间点无明显变化；对照组3d为弱阳性表达呈浅黄染色，7d染色加深，14d达高峰呈强阳性表达棕色，28d染色呈浅黄色；实验组各时间点阳性表达均弱于对照组，但明显强于正常组。免疫组织化学的半定量检测结果：正常组3d、7d、14d及28d的半定量检测结果分别为：O．113士0．015、O．117士0．009

8、、O．115士O．124、O．117士0．006；对照组各时间点的半定量检测结果分别为：0．424士0．031、O．538士0．073、