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1、银杏叶提取物对大鼠视网膜神经节细胞的保护作用论文.freelmHg的眼压维持60min,左眼未做损伤,作为正常对照。阴性对照组于损伤后2h及此后每日腹腔分别灌胃生理盐水5mL/kg。按这种给药方法,阳性对照组给予1%灯盏细辛5mL/kg,用药组给予1%银杏叶提取物5mL/kg,实验持续时间28d。动物安死术前5d用3%荧光金双上丘注射,逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜定向铺片,距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片。利用彩色颗粒分析软件做节细胞计数,计算各组节细胞的存活率并做统计分析。结果阴性对照组、阳性对照组、用药组节细胞存活率分别为61.46%、72.73%、76.20%
2、。用药组与阴性对照组的节细胞存活率存在显著性差异(P0.05),用药组与阳性对照组无显著性差异(P0.05),.freelia-reperfusioninjury.MethodsThirtySprague-Dalydividedintothreegroups.Thenegativecontrolgroup,positivecontrolgroup,treatmentgroupalsaline5mL/kg,1%erigeronbreviscapus(vant)hand-mazz(EBHM)5mL/kg,1%EGb7615mL/kg,respectively2hourafterin
3、juryandeverydayafteroperation.Retinalganglioncellsentgrouprespectively.ConclusionEGb761hasneuroprotectiveeffectonretinalganglioncellsinacutehighintraocularpressureinducedretinalischemia-reperfusioninjury.KeyL/kg麻醉动物,瞳孔散开后,在手术显微镜下,将连接生理盐水瓶输液管的7号小儿头皮针刺入大鼠前房,避免损伤虹膜及晶体,盐水瓶升高至距离实验眼150cm处,此高度可在眼内形
4、成110mmHg的眼压,此时肉眼可见球结膜苍白,眼底镜可见视网膜缺血,维持60min。而后降低盐水瓶高度使其与实验动物眼部达到同一水平,拨出针头,此时可见眼结膜充血,亦可见视网膜血液,立即重新再灌注,视网膜动脉及静脉立即恢复高眼压前的充盈状态。术后大鼠双眼涂抗生素眼膏,待清醒后回笼,持续喂养28d。2.2给药阴性对照组于损伤2h后每日腹腔灌胃生理盐水5mL/kg。按这种给药方法,阳性对照组给予1%灯盏细辛5mL/kg,用药组予1%银杏叶提取物5mL/kg,实验持续时间为28d。2.3逆行标记动物安死术前5d采用双上丘注射法逆行标记(RGC)。将动物麻醉,将其固定在脑立体定位仪上
5、,牙科钻钻开颅骨,用微量注射器吸取3%荧光金,每侧上丘注射2点(前囟后5.9mm和6.4mm,旁开1.4mm,深4.0mm),每点注射1.5μL。2.4视网膜定向铺片1实验第28天,实验动物在深麻醉下,于12点做球结膜缝线标记,立即摘除眼球放入4%多聚甲醛磷酸缓冲液中固定,2h后分离视网膜并将其定向铺片,自然干燥。VectashieldH-100荧光增强剂及市售无色指甲油封片。2.5图像分析荧光显微镜拍摄照片,距离视乳头中心2mm上下左右各拍摄照片一张,照片放大倍数125×。使用联想Mustek扫描仪将照片以100dpi扫入计算机,使用颗粒分析软件进行RGC计数2,将上下左右4
6、张照片RGC数量累加,并转化成该眼RGC单位面积数量。RGC存活率=右眼RGC单位面积数量/左眼RGC单位面积数量×100%。2.6统计学方法使用SPSSfororeauJP,EckJ,McCabeJ,etal.AbsorptiondistributioneteliminationdelextraitmarquedeGinkgobilobachezleratJ.PresseMed,1996,15：1458－1463.
