富硒魔芋精粉葡甘聚糖和硒含量的测定分析

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1、２０１１（２）陕西农业科学６１富硒魔芋精粉葡甘聚糖和硒含量的测定分析杨芳，谢娟平，王中兴，李川，郝妮妮，李民（安康学院农学与生物科学院，陕西省食品工程中心，陕西安康７２５０００）摘要：研究出发点是综合检测安康魔芋精粉ＫＧＭ和硒的含量。用ＤＮＳ法测定安康魔芋精粉葡甘聚糖的含量。超声波辅助消解－氢化物发生－原子荧光光谱法测定安康魔芋精粉中全硒。测定结果表明，一级精粉、魔芋微粉、纯化精粉葡甘聚糖的含量分别为４６．９７％、５４．９８％和７５．９８％；纯化魔芋精粉多糖中硒含量的平均值为０．２３８６±０．０１３６ｍｇ／ｋｇ、蜡烛山品牌一级精粉硒含量为５．０６８ｍｇ／ｋｇ。实验表明魔芋中多糖富集硒能

2、力很强，为后期分析其生物学功能以及魔芋硒多糖的开发提供一定的实验依据。关键词：魔芋；葡甘聚糖；硒魔芋葡甘聚糖（ｇｌｕｃｏｍａｎｎａｎ或ｍａｎｎａｎ）常在４℃放置７－１０ｄ以后使用。缩写为ＫＧＭ。ＫＧＭ是由Ｄ－葡萄糖和Ｄ－甘２．１．２魔芋葡甘聚糖测定液的制备方法准确露糖约按１∶１．６（ｍｏｌ／ｍｏｌ）的比例，以，４－称取样品０．１９５０ｇ，加入盛有５０ｍｌ甲酸氢氧化β－１［１］糖苷键连接的高分子多糖，在主链甘露糖的Ｃ３钠缓冲液并处于电磁搅拌状态的１００ｍｌ容量瓶位上存在着通过，３键结合的支链结构，每个中，３０℃搅拌溶胀４ｈ，溶胀过夜，用甲酸－氢氧β－１糖残基上有三个左右支链，支链只有几个

3、残基的化钠缓冲液定容至１００ｍｌ。搅拌均匀后在离心长度。秦岭大巴山地区有着丰富的魔芋资源。安机上以４０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，此上清液即为康富硒地层厚度达４０－５０ｍ，富硒浓度适中，易魔芋葡甘聚糖提取液，该步骤去处了魔芋粉中的于被植物吸收，不含毒素元素，被专家一致评价为游离还原糖对测定结果的影响。准确移取２５．０“优质、环保、安全”的富硒区域。笔者研究出发点ｍｌ魔芋葡甘聚糖提取液于１００ｍｌ容量瓶中，准是综合检测安康魔芋ＫＧＭ和硒的含量，测定安确加入３ｍｏｌ／ｌ硫酸２０ｍｌ，摇匀，在沸水浴中具康本地市面销售的几种魔芋精粉中葡甘聚糖和硒塞密封水解１．５ｈ，冷却。加入６ｍｏｌ／ｌ氢氧

4、化钠含量。２０ｍｌ，摇匀，加蒸馏水定容至１００ｍｌ，即得待测液。１仪器、材料２．１．３建立标准曲线葡萄糖标准溶液配制ＰＦ６－２型非色散原子荧光分光光度计，（１．０ｍｇ／ｍｌ）：在分析天平上准确称取０．１０００ｇＳＹ２２００－Ｔ型超声波清洗机。所用魔芋精粉均分析纯葡萄糖（预先在１０５℃干燥至恒重），溶于购自安康魔芋加工生物科技有限公司。苯甲酸水中，定容至１００ｍｌ。依次移取０．４、０．８、１．２、１．６、２．０ｍｌ标准葡萄糖工作液、２．０ｍｌ蒸２方法馏水于６个５ｍｌ比色管中，加蒸馏水补足至２２．１葡甘聚糖的测定ｍｌ，再在每个容量瓶中加入２．０ｍｌ显色剂ＤＮＳ，２．１．１显色剂的配制方法苯

5、酚显色剂摇匀后将６个容量瓶放在沸水浴中加热５ｍｉｎ，［１］（ＤＮＳ）：Ａ液：溶解６．９ｇ结晶的重蒸馏的苯酚立即冷却。用蒸馏水定容至２５ｍｌ，摇匀。以蒸于１５．２ｍｌ１０％氢氧化钠溶液中，稀释至６９ｍｌ，馏水显色反应液做空白调零，用１ｃｍ比色皿在在此溶液中加入６．９ｇ亚硫酸氢钠。Ｂ液：称取５５６ｎｍ处测其吸光值。记录不同浓度葡萄糖工２２５ｇ酒石酸钾钠，加入到３００ｍｌ１０％氢氧化钠作液的吸光值Ａ。以吸光度为纵坐标（Ｍ），葡萄溶液中，再加入８８０ｍｌ１％３，５－二硝基水杨酸糖毫克数为横坐标（Ａ），绘制标准工作曲线。溶液。将Ａ液与Ｂ液混合，贮于棕色试剂瓶中。２．１．４样品葡甘聚糖测定准确移取

6、以上制得收稿日期：２０１０１１０７项目来源：陕西省教育厅自然科学基金项目（０９ＪＫ３２１），陕西省自然科学基金项目（２０１０ＪＭ４０５２），安康学院科技专项（２００８ＡＫＸＹ０１３）。作者简介：杨芳（１９７４－），女，硕士，讲师。６２陕西农业科学２０１１（２）的葡甘聚糖待测液２．０ｍｌ于５ｍｌ比色管中，加液０．００，２．００，４．００，８．００，１２．００，１６．００，入２．０ｍｌ显色剂ＤＮＳ，在沸水浴中加热５ｍｉｎ，２０．００ｍｌ置于５０ｍｌ容量瓶中，用盐酸（５＋９５）冷却后用蒸馏水定容至５ｍｌ，在分光光度计上溶液稀释至刻度，摇匀，按照仪器工作条件测定系５５６ｎｍ处比色，以蒸馏水

7、显色反应液做空白调列标准溶液。零，测定溶液的吸光度值Ａ，做７个重复。在标准２．２．３样品分析开机，设定好仪器工作条件，曲线上查出（或通过回归方程计算）吸光度所对输入样品质量、定容体积等有关参数，原子化器点应的葡萄糖毫克数。结果按下式计算：魔芋葡甘火，仪器预热２０ｍｉｎ。启动自动进样系统，依次：Ｍ×２００测定空白溶液、系列标准溶液、样品溶液的荧光强聚糖含量＝×１００％（式中，ε：葡甘聚糖Ｍ×２０００度。由仪器自动计算结果。中葡萄糖和甘露糖残基分子