两个携带线粒体nd1+t3394c突变的leber遗传性视神经病变家系的相关-研究

《两个携带线粒体nd1+t3394c突变的leber遗传性视神经病变家系的相关-研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、温州医学院研究生硕士学位论文进行进一步的眼科临床检查，详细询问家族史并记录。然后使用设计好的24对引物对其进行线粒体全基因扩增、纯化和测序。5．使用生物软件(包括DNAStar5．0、Chromas2．24、ClustalX1．83等)对测序结果与剑桥序列(NC012920)进行比对分析，确定线粒体基因变异位点及其单体型，分析NDlT3394C对LHON发病的影响。6．根据Genbank选取17种不同进化物种如：人(Homosapiens)、牛(Bostaurus)、鼠(Musmusculus)、非洲爪蟾(Xenopuslaevis

2、)等不同物种对线粒体序列进行种系发生学分析。7．同样，收集116例正常对照(仅限汉族人群)根据上述所述方法抽取3-5mL外周静脉血后进行线粒体基因分析。结果1．自2004年以来，到2012年12月，本课题组己收集了12l8个视神经萎缩家系，其中携带LHON三个原发突变位点的家系504个，包括429个G11778A突变家系、16个G3460A突变家系、59个T14484C突变家系。2．这两个家系表现有典型的LHON临床症状和遗传学特点，家系母系成员分别为17位和13位，外显率分别为24％和46％。3．对家系进行mtDNA全序列测序分析

3、发现其携带原发突变外，还有其它碱基突变，mtDNA单体型均属于东亚单体型M9a。在这所有的突变中有很有意义的NDI亚基上高度保守的T3394C突变。4．在116例正常对照中发现4例携带有T3394C突变。结论1．三个原发突变位点存在中国LHON患者中，但并不是每个携带者均出现LHON症状。中国LHON人群中，T14484C突变频率和白种人接近，G3460A突变的频率明显低于白种人，但是G11778A突变频率则明显高于白种人。2．这两个家系具有典型的LHON临床表现和家族遗传特点，而且外显率较高，G11778A和T14484C分别是其

4、主要的致病因素。3．3394位于NDl第30位保守性位置，其突变使得组氨转换为酪氨酸，并且该突变已证实与代谢性疾病和遗传性耳聋有关，本研究在正常对照组中发现4例携带该突变位点，这两个家系外显率较高，表明该突变位点可能协同原发突变位点提高LHON的外显率。4．家系先证者单体型均属于单体型M9a，可能协同原发突变位点对LHON的发病起促进作用。5．家系母系成员相同的mtDNA表现不同的病情严重程度，表明环境因温州医学院研究生硕士学位论文素、核修饰因子等可能影响LHON的表型表达。关键词Leber遗传性视神经病变；基因突变；线粒体DNA：

5、单体型6温州医学院研究生硕士学位论文TheanalysisofLeber’ShereditaryopticneuropathyassociatedwithmitochondrialNDlGeneT3394CmutationintwoChinesefamiliesAbstractObjective1．CollectingfamiliesofhereditaryopticneuropathyallaroundofChina，buildingdatalibraryandbloodsamplespoolofclinicalandmolecu

6、largenetic．2．ScreeningforthepresenceofthreeprimaryLHON—associatedmtDNAmutation(NDl／G3460A、ND4／G11778A、ND6／T14484C)andcomputingeverymutation’SspectrumofLHONinourcollectedpedigrees·3．TostudymitochondrialgenomeofLeber’ShereditaryopticneuropathyassociatedwithmitochondrialN

7、D1GeneT3394CmutationintwoChinesefamilies．4．TofurtherstudyingtheroleofmitochondrialNDlT3394CmutationinthemolecularlevelmechanismofLHONandprovidethebasisfortheclinicaltreatmentofLHON．MeteralsandMethods1．WecooperatewithBeijingDongfangHospitalandEyeHospitalofChinaAcademyof

8、TraditionalChineseMedicine，EyeHospitalofXingtaishi，Hebeiprovince，MedicalUniversity，SchoolofOphthalmologyandOptometry，