产甘油假丝酵母补料发酵中的甘油合成衰减

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1、2012-10-25DOI:10.3724/SP.J.1145.2012.00791http://www.cibj.com/应用与环境生物学报ChinJApplEnvironBiol2012,18(5):791~796产甘油假丝酵母补料发酵中的甘油合成衰减*丁小云1,3诸葛斌1,3**方慧英1,3宗红1,3刘晓筱1,3王雨倩1,3诸葛健2,31(江南大学工业生物技术教育部重点实验室无锡214122)2(江南大学食品科学与技术国家重点实验室无锡214122)3(江南大学生物工程学院工业微生物研究中心无锡21412)摘要为揭示产甘油

2、假丝酵母Candidaglycerinogenes补料发酵后甘油合成衰减机理,以指导甘油合成及菌株改造,对补料发酵后甘油的生成情况、葡萄糖的消耗情况、细胞内的代谢流量变化以及代谢途径关键酶活力变化进行了研究.结果表明,补料发酵后葡萄糖的代谢流量分布发生变化,流向HMP途径和甘油合成途径的流量分别降低48%和33%,更多的碳流通过EMP途径形成副产物;胞浆3-磷酸甘油脱氢酶(ctGPD)和6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)的活力下降,而丙酮酸激酶(PYK)活力上升.补料发酵后甘油合成关键酶ctGPD酶活力低下,流向甘油合成途径的碳

3、流减小,还原力供给受影响,这些因素共同作用引起了补料发酵后甘油合成的衰减.图4表2参22关键词产甘油假丝酵母;补料发酵;甘油合成衰减;代谢流;关键酶CLCTQ920.1:TQ923GlycerolSynthesisAttenuationofCandidaglycerinogenesinFed-batchFermentation*DINGXiaoyun1,3,ZHUGEBin1,3**,FANGHuiying1,3,ZONGHong1,3,LIUXiaoxiao1,3,WANGYuqian1,3&ZHUGEJian2,3(1Key

4、LaboratoryofIndustrialBiotechnologyofMinistryofEducation,JiangnanUniversity,Wuxi214122,Jiangsu,China)(2StateKeyLaboratoryofFoodScienceandTechnologyofChina,JiangnanUniversity,Wuxi214122,Jiangsu,China)(3ResearchCenterofIndustrialMicroorganisms,SchoolofBiotechnology,Jia

5、ngnanUniversity,Wuxi214122,Jiangsu,China)AbstractThepreviousresultedshowedthatinfed-batchfermentationofCandidaglycerinogenes,theglycerolconcentrationdecreasedby13%,theconversionratioofglyceroldecreasedby34%,theglycerolsynthesisratedecreasedby67%andtheglucoseconsumpti

6、onratedecreasedby44%.Inordertorevealthemechanismofglycerolsynthesisattenuation,theglycerolsynthesis,glucoseconsumption,intracellularmetabolicfluxdistributionandtheactivityofkeyenzymesinmetabolismwereinvestigated.Itwasfoundthatthemetabolicfluxdistributionchangedcompar

7、edwithbatchfermentation.Themetabolicfluxdecreasedby48%and33%respectivelyinHMPandglycerolsynthesispathwaywhilethemetabolicfluxincreasedinEMP,whichledtotheincreaseofby-products.TheactivityofctGPDandG6PDHdecreased,whiletheactivityofPYKincreased.ctGPD,akeyenzymeforglycer

8、olformation,directlyaffectedtheglycerolformation.G6PDHinfluencedthecarbonfluxtoHMP,whichnotonlyplayedanimportantroleincellgrowth,bu

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