游仆虫核糖体蛋白l11功能研究

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1、万方数据ThesisforMaster’SDegree，ShanxiUniversity，2010TheFunctionalAnalysisofRibosomalProteinL1fromEuplotesoctocarinatusStudentNameGuo—qiangZhangSupervisorProf．Ai—huaLiangMajorBiochemistryandMolecularBiologyFieldofResearchCellMolecularBiologyDepartmentInstituteofBiotec

2、hnologyResearchDurationSeptember,2007toJune，2010万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·Ill第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”II．I核糖体蛋白概述I．I．I核糖体的结构与生物发生1．i．2核糖体蛋白的分类与功能I．2核糖体蛋白LII的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘1．2．1核糖体蛋

3、白L11概述⋯．⋯⋯'⋯．⋯⋯’I．2．2RPLII参与HDM2一p53反馈调节⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”21．2．3RPLI1对c—Myc的负反馈调节⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1．2．4RPLll与肿瘤抑制41．3实验材料及本课题的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～1．3．1八肋游仆虫⋯⋯1．3．2本研究的目的与意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘6第二章八肋游仆虫核糖体蛋白L11的定位分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘82．1．1细胞与质粒⋯⋯一2．1．2工具酶及试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．2方法⋯⋯⋯2．2．1重组表达质粒pEGFP—N1一EoRPLl1的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘82．2．2转染级质粒的制各2．2．3细胞培养⋯⋯⋯．．2．2．4质粒转染⋯⋯⋯一⋯--．．．．．．．．．-．．．⋯·⋯·⋯···········-·······-·-·····⋯⋯--··--·--··92．2．5RT-PCRj子1斤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯～92．2．6Westernblotj子析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯92．2．7观察EoRPLl1的定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。102．3结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘102．3．1重组质粒pEGFP．N1．EoRPLl1的构建·2．3，2EoRPLl1的表达鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10万方数据2．3．3EoRPLl1的定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·122．4讨论·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·-⋯··⋯·．·．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13第三章EoRPLll的过表达对HEK293T细胞蛋白质翻译的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-143，1．1细胞与质粒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·143．1．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-·143．1．3寡聚核苷

7、酸⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”143．2方法3．2．1重组表达质粒pCMV-Myc—EoRPLll；fUpCMV-Myc-GST的构建⋯⋯⋯⋯一3．2．2转染级质粒的制各⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·3．2．3RT-PCR和Westernblot检测蛋白的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3．2．4报告基因活性的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-3．2．5实时定量PCR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-·3．3结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-3．3．1重组质粒pCMV-Myc—EoRPLIl和pCMV-Myc—GST腻J建⋯⋯⋯⋯⋯⋯-3．3．2重组蛋白在HEK293T细胞中的表达鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·3．3．3过表达EoRPLll对荧光素酶合成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-3．