蝎毒耐热蛋白对大鼠海马神经元电压门控性钠通道电生理特性影响

《蝎毒耐热蛋白对大鼠海马神经元电压门控性钠通道电生理特性影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：区整z芸签字日期：—正年』月上日学往论文版权使用授权书本学位论文传者及指导教师完全了蝣大连医辩大学有关像窝、使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门缄机构送交学位论文的复印件和电了版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连蹶科大学可戳

2、褥本学使论文鳐全部或部分蠹赛编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。论文作者签名：邀．．鱼．叁，指导教师签名-。．』薹羔圣签字露期：丝年』月互基蝎毒耐热蛋白对大鼠海马神经元电压门控性钠通道电生理特性的彩晌硕士舒究生：张晓芸稳导教簿：李韶指毕小组：专业名称：点靖宇孙长凯李爱萍朴花生理学摘要教授副教授鹜景及目的：钠通道在可兴奋缨胞动作电位的产生和信号传导中起誊重要的僚耀，其绪稳与璃麓酶改变与谗多痰瘸鼹发童农发展密韬穗关。癫痫为最常见的神经系统疾瘸之～，其发瘸机制目前并不十分清楚，但其发作的瘸理生理学核心是脑内神经元超兴奋性，即受累神经元过度去极纯

3、，使足够数量的裤经元圊步去掇纯，造成大量钠离子内滚，并形成可传播的动作电位，产生癫瘸的发作。目前，越来越多的证据表明，钠通道的功能障碍与癫痫的发生发展密切相关，因此钠通道已成为目前抗癫痫药物开发的重要靶点。我室张万琴教授多年从事蛾毒药物开发研究，麸竭毒毒素中提取潦其有抗瘢瘸作用的活性多肽。逶避特殊工艺处理后，获得具有抗癫痫作用的蝎毒耐热蛋白。本课题是应用全细胞膜片钳技术在急性分离的大鼠海马神经元上观察蝎毒耐热摄自(sco印ionvenom琢嫩＆sis拓睡鞭瓣趣S瓣)对淫繇毒素敏感黧脚症痰oXi鞋Sensitive，卅Ⅸ．s)电压门控性钠通道的影响，以期深入探讨蜗毒耐热蛋白抗癫痫作

4、用可能的分子机制。材料墨方法：应用全细胞膜片钳技术，数急性分离豹7。lO天Sp嘲明e．Dawley(S。D，)大鼠海马神经元为研究对象，观察蝎毒耐热蛋蠢对海马神经元11x．S型电压门控1生钠通道电生理学特性的影响。用胰鬣囱酶消化加机械分离方法分离获锝海马神经冗，在膜片钳全细胞模式下，霹绥照膜上镧离子遗遵的电生理活动进行记录。电极蠹滚孛约esel阻断钾通道，细胞外液巾的CdCl2阻断钙通道，全细胞模式记录到一内向电流，此内向电流可以被1州河豚毒素完全阻断，证实此通道为霸Ⅸ·S钠遥道。通过形态攀及电生理学方法鉴定海马害孛经元螽，褒察蝎毒耐热蛋白对海马神经元电压门控饿钠通道电流电生理学

5、特性的影响。结果：倒置生物显微镜下观察，分离完整的海马神经元表面光洁，有较强的晕光，面且有较长的轴突和树突。胞体成锥形或三角形，有一个辘突，嚣个绞多个穗突，辘突可长送200陋以上。完整瀚海马神经元维持其形态至少4个小时。由EPC．10膜片钳放大器电流钳模式测得细胞膜静息膜电位(RestiIlgpotential，Rp)为_56．25士9．32mV(n一62)。膜电容(Me搬&髓eC神aci趣lee'em)戈12．98妁。77舞‘(魏习6≥。事联邀隆(s蘸esResistance，黜)为15．28士1．13MQ(n=36)。细胞膜的时间常数铲cm×Rs，f假为209．78士23．7

6、4邮。J．四种不同浓度的sⅥ碾p(O．o001～1旧m1)，均毹降低海马神经元朝∞S钠遂道电流峰值，为浓度依赖性关系，与对照缀福魄具有显著差异

7、V(酽8，户》0．05)，凭统计学意义，K为4。4l士o。王4；给予O．1超勉lS珊后V沈交为．23。96鲻．4l搬V(n_8，弘瓣．笛’，有统计学意义，K为3．73圭o．憾。结果表嚼SⅥ碌P可没浓度依赖做使电压门控性钠通道激活曲线向藏电位方向移动，即通邋开放减慢。如Sv}珏理处理过的海马睾申经元稳态失活曲线亦发生变化。正常TTX_S型钠电流露事数失活电莲(v纯)荛-32。6汪l。52mⅥn=l◇，勰坡医子(

8、c)为6．73士o．5l，在给予O．Olp鲫瞄的S脚后Vl尼变为一44