糖尿病大鼠海马神经元电压门控钠离子通道的研究论文

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1、糖尿病大鼠海马神经元电压门控钠离子通道的研究论文【摘要】[目的]研究糖尿病大鼠海马神经元电压门控钠离子通道的变化,探讨糖尿病神经系统的退化机制。[方法]用全细胞膜片钳技术记录糖尿病大鼠海马神经元Na+电流的变化。[结果]糖尿病大鼠海马神经元电压门控钠离子通道的Na+电流IV曲线明显上移。[结论]糖尿病大鼠海马神经元钠离子通道Na+电流水平下降。【关键词】糖尿病;海马神经元;钠离子通道;电压门控;实验研究Abstract:[Objective]Tostudythechangeofvoltagegatedsodiumchannelofdiabeticrats’hippocamp

2、alneuronsandexplorethedegeneratingmechanismofdiabetes’snervesystem.[Methods]Sodiumcurrentsofdiabeticrats’hippocampalneuronsptechnique.[Results]TheIVcurveofsodiumcurrentsofvoltagegatedsodiumchannelofdiabeticrats’hippocampalneuronsuchhigherlevel.[Conclusion]Sodiumcurrentsofvoltagegatedsodium

3、channelofdiabeticrats’hippocampalneuronsdecreased.Keypalneuron;sodiumchannel;electricpressurecontroleddoor;experimentalstudy离子通道是镶嵌于膜脂质双分子层中的糖蛋白,是膜电位形成的基础,它们形成的动作电位与梯度电位是神经元之间信息交流的基础,可分为门控性和非门控性[1]。糖尿病病人晚期常有痴呆的表现[24],主要表现为学习、记忆能力下降,神经系统存在一定的功能障碍,而学习记忆的关键部位在海马。本项目研究糖尿病大鼠海马神经元钠离子通道的变化.freel

4、a公司产品。1.2动物模型制备将适应性饲养1g/kg;正常对照组大鼠腹腔注射相同剂量的PH4.4枸橼酸钠缓冲液。3天后选择尿糖(+++~++++)、血糖≥16.7mmol/L者为造模成功。1.3大鼠海马神经元的急性分离腹腔注射STZ8厚的脑片,加入蛋白酶在30℃下消化30min后用孵育液洗脑片3次,放入盛有氧饱和标准细胞外液的离心管内,用Pasteur吸管轻轻吹打,静止约2min,取上部的细胞悬液加入含标准细胞外液的灌注槽内,约15min后细胞贴壁于涂布多赖氨酸的圆形盖玻片上,即进行全细胞膜片钳记录。1.4全细胞膜片钳记录玻璃微电极拉制后尖端直径为1~2μm,充灌电极液后电阻

5、2~8mΩ,记录在室温(20~24℃)下进行.采用Axoclamp2A膜片钳放大器记录膜电流,膜电流信号经放大器输入DigiData1200BA/D,D/A转换器进行数模转换后存入计算机硬盘,采样频率10KHz,钳制电位、信号采集与储存和结果分析等均借助计算机用Pclamp6.0.4和Origin5.0软件完成,数据处理采用SPSS10.0统计软件,数据以均数±标准差(x±s)表示,组间显著性采用t检验。2结果2.1一般情况观察正常组大鼠警觉好动,毛色光泽,每天每只大鼠平均自由饮水约70ml左右;成模后模型组大鼠反应明显迟钝,精神萎靡,喜欢趴在鼠笼上,毛色渐渐失去光泽,每天每

6、只大鼠平均自由饮水约200ml左右,尿量明显增加。两组大鼠空腹血糖变化见表1。表1两组大鼠空腹血糖比较(略)与正常对照组比较,△△P0.012.2糖尿病大鼠海马神经元Na+电流I-V曲线的变化在钳制电压置于-100mV,给于-100mV到0mV的阶梯去极化脉冲刺激(步幅为10mV,波宽为20mS,频率为0.5Hz),记录得到的电流可被1μmol.L-1的河豚毒素阻断,证实为Na+电流.取电流幅度的平均值为纵坐标,对相应的膜电位作I-V曲线,.freelembranechannelsorchennelopathies[J].ClinicalNeurophysiology,200

7、1,112:218.[2]盛树力.糖尿病脑病与老年性痴呆[J].中华内分泌代谢杂志,2001,17(1):5859.[3]翼瑞俊,贾建平.糖尿病认知障碍的相关因素分析[J].脑与神经疾病杂志,2003,11(2):6972.[4]OttA,StolkRP,vanHanskampF,etal.Diabetesmellitusandtheriskofdementia:theRotterdamStudy[J].Neurology,1999,53(9):1937194.

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