化学合成227氧甲基鸟嘌呤核苷（p6）诱导hela细胞凋亡的作用与其机制的研究

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1、学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谓}意。学位论文作者签名：蕴亟整日期：年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交

2、论文，并编入有关数据库。鳓期：年月日缩略词≯Ac．DEVD—AMC≯Ac．DEVD．CHO≯AICD》ArNs≯AMC≯Bcl—2≯Casp∞e>ConA>DEPC>DMSO>EB≯EDltA>FAB．MS≯FBS≯FCM>HPLC英文缩略词英文全称∞dyl一L—aspa田1-L-舀utatIlyl—Lvaly—L-aSpan·7一aInino-4·methvlcoufn痂acetyl—L—asp矧yl—L西utamyl·L—Valy·L-asp缸-1-aidehydeActiⅥ旺ionInducedCeUDe抽Apoptosis-hldu

3、dngNucleosides7-aⅡlino-4-metbylcol】ln丑rinB—ce】l1ymph咖a／】eukemia2cystdnylasp删e_specificprote雏eConcanavaIinADiemylpymcarbonateD-Ⅲ增chylsuIfoxideEtMdiumBromideBnlylenedi锄inctetr∞c嘶cAc试F船tAtomBOmb耵dment—Massspec订Dme仃yFeta】BovineSemFIowC”ome仃yHjghPer丘ⅡmanceLic叫dHjghPer丘ⅡmanceLiq

4、uidalmmatog。aphy中文译名半胱天冬蛋白酶．3底物半胱天冬蛋白酶．3抑制剂活化诱导的细胞死亡凋亡诱导核苷7．氨基_4．甲基香豆素B细胞淋巴瘤／白血病基因2半胱天冬蛋白酶刀豆蛋白A焦碳酸二乙酯二甲基亚砜溴化乙锭乙二胺四乙酸高速原子轰击质谱法胎牛血清流式细胞术高效液相色谱法缩略词>LGL≯Ⅳ盯T>N凇》NS>OD>P6>PBS>PI≯RT二PCR>TLC>ⅡmiEL>WGA英文全称LargeG瑚ldarL)，Inphocyte3-(4，5-Dim础yl“azol一2·y1)一2，5一diphenylterazoliiuNhclear

5、MagneticResonanceNatl】ra】Suppressor0pticalDensity2’·O．me吐1)dgu锄oshePhosphate—Bu腩redSalinePropidiumIodideReverseTraIlscription．PolymeraSeChainReactionn血-layer-c}∞mato乎印hyTe曲inaldeoxy肌cleo删etranSferasefrdDmediateddUTPnickendlabelingwheatge珊agglutillin2中文译名大颗粒淋巴细胞四甲基偶氮唑盐核磁共振自

6、然抑制细胞光密度2’．氧．甲基鸟嘌呤核苷磷酸盐缓冲液碘化丙啶逆转录．聚合酶链式反应薄层色谱法原位缺口末端标记麦胚凝集素越荽摘要【嚣瓣】溪察纯擎台残豹弼嚣挠耱癌{擎臻，强时观察P6对正常缁稔游E的作用，以反映其是否有剐作用。并初步探讨了P6抗肿瘸作用的可能机制。【方法】1．细胞培养在本实验中，}Iela细胞混悬于含2％FBs的RPMIl640培养液，小鼠淤巴缨腿混悬予禽15％翔．s的RP§程l戳O培养渡，予37℃5％e02条传下培养。两种细胞均分为四组，于培养开始时分别给予O肛咖nL、50}I醣nL、l∞弘豳L及150驻薛吐静搿。}骥鑫缨魏培

7、葬l稻枣游，枣鬣涤邑维稳珞养72小时。2．淋巴绷施的滤纯淋巴细胞取自小鼠脾脏，并经conA(2．5pg，mL)灞化，加入不周浓度的P6(O～150肛g，mL)后，培养72小时。3．形态学戏察秘MTT安验Hela细胞及小鼠淋鼹细胞在培养时给予P6(O～150州mL)。以形态学瓣察豹方法戏察镶蕤豹影态改变，数醚墨了躬方法检蕤鬃疆懿增建获况。4．ⅨqAladder梭测提取经P6(O～150pg，mL)她理的}萋cla缩臆及活仡躺，j、鼠淋巴细魏驹DNA进行琼脂糖凝胶电泳，检测DNA片段的形成。5．R1二PCR技术提取经P6(娅150牲)处理戆}瓣

8、a缨臌及活化的小鼹撩巴缨腿孵总mRNA，用R*PcR的方法分析Ba)【旗因及Bcl．2基因的转录水平。6+滚式缡膣寒Hela细胞及小鼠淋巴细胞在培养时给予P6(O～150雌，mL