mir-125a-5p抑制3t3-l1前体脂肪细胞分化

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1、ISSN1007-7626中国生物化学与分子生物学报http://cjbmb．bjmu．edu．cn2014年11月CN11-3870/QChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiology30(11):1147～1154DOI:10.13865/j．cnki．cjbmb．2014.10.14MiＲ-125a-5p抑制3T3-L1前体脂肪细胞分化1)1)1)1)2)*1)纪洪雷，宋成创，李优磊，李岳峰，郑雪莉，杨公社1)(西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，陕西杨凌712100;2)西北农林科技大学林学院，陕西杨凌712100

2、)摘要MicroＲNAs(miＲNAs)是一类在脂肪组织发育中发挥重要作用的小非编码ＲNA．为探明miＲ-125a-5p在3T3-L1前体脂肪细胞中的作用，采用实时qPCＲ检测了miＲ-125a-5p在小鼠各组织及3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中的表达;使用经化学修饰的miＲ-125a-5p模拟物agomir及抑制剂antagomir转染3T3-L1前体脂肪细胞，采用实时qPCＲ和Western印迹检测成脂标志基因Pparγ和aP2的表达，油红O染色观察脂肪细胞脂质积累．结果显示，miＲ-125-5p在小鼠脂肪组织中高丰度表达，在3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中表达下降．过表达miＲ-

3、125a-5p，与对照组相比，成脂标志基因Pparγ和aP2在mＲNA和蛋白质水平均明显下降;油红O染色及定量结果显示脂质积累减少．抑制剂处理结果显示，Pparγ和aP2在mＲNA和蛋白质水平均有不同程度上升，但油红O染色及定量结果差异不显著．以上结果表明，miＲ-125a-5p在脂肪细胞分化中发挥负调控作用．关键词miＲ-125a-5p;3T3-L1;脂肪;细胞分化中图分类号Q786;Q254MiＲ-125a-5pisImplicatedin3T3-L1PreadipocytesDifferentiation1)1)1)1)JIHong-Lei，SONGCheng-Chuang，LIYo

4、u-Lei，LIYue-Feng，2)*1)ZHENGXue-Li，YANGGong-She1)(LaboratoryofAnimalFatDepositionandMuscleDevelopment，CollegeofAnimalScienceandTechnology，NorthwestA＆FUniversity，Yangling712100，Shaanxi，China;2)CollegeofForestry，NorthwestA＆FUniversity，Yangling712100，Shaanxi，China)AbstractmiＲNAsaresmallnon-codingＲNAst

5、hatareimportantforadiposetissuedevelopment．ToexplorethefunctionofmiＲ-125a-5pduringtheinduceddifferentiationof3T3-L1preadipocytes，weanalyzedthemiＲ-125a-5pexpressionlevelsbyreal-timeqPCＲ．FollowingthetransfectionofmiＲ-125a-5pagomirorantagomirinto3T3-L1cells，theexpressionofadipogenicmarkergenesPparγan

6、daP2werealsodetectedbybothreal-timeqPCＲandWesternblotting．ThelipiddropletformationwasassayedbyoilredOstaining．TheresultsshowedthatmiＲ-125a-5pwasexpressedathighlevelsinadiposetissue，andwasdownregulatedduringtheprocessofadipogenesis．Thedifferentiationof3T3-L1wasimpairedwithmiＲ-125a-5poverexpression，

7、associatedwiththedecreaseofPparγandaP2expressionatmＲNAandproteinlevels．TheoverexpressionofmiＲ-125a-5palsoledtoanotablereductioninlipiddropletsasdetectedbyoilredOstaining．However，theresultsofmiＲ-125a-5pantagomirtr