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《kctd15基因调控3t3-l1脂肪前体细胞分化的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、第35卷第11期第三军医大学学报Vol.35,No.112013年6月15日JThirdMilMedUnivJun.1520131115文章编号:10005404(2013)11111504论著KCTD15基因调控3T3L1脂肪前体细胞分化的研究12211徐景,赵旭,杨莹,徐梓辉(400037重庆,第三军医大学新桥医院内分泌科;100029北京,中国科学院北京基因2组研究所重大疾病基因组和个体化医疗实验室)[摘要]目的探讨含钾通道四聚化结构域15(KCTD15)基因在3T3L1脂肪前体细胞分化过程中的作用。方法①采
2、用半定量逆转录PCR检测在3T3L1脂肪前体细胞分化过程中KCTD15mRNA表达变化。②在3T3L1脂肪前体细胞增殖早期通过RNA干扰技术靶向敲低KCTD15基因的表达,在靶向敲低KCTD15基因后的转染KCTD15siRNA48h后通过半定量逆转录PCR验证KCTD15基因的敲低效果。用油红O染色法观察KCTD15敲低后3T3L1细胞第0天和第10天的细胞形态学改变。③采用半定量逆转录PCR检测KCTD15基因敲低后PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ成脂基因的变化。结果在3T3L1脂肪前体细胞分
3、化过程中,KCTD15mRNA表达水平逐渐降低(P<0.05);KCTD15敲低能显著抑制3T3L1脂肪前体细胞分化;KCTD15敲低后PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ成脂基因无明显变化。结论在分化早期阶段敲低KCTD15基因能抑制3T3L1脂肪前体细胞分化。[关键词]KCTD15基因;3T3L1脂肪前体细胞;细胞分化;肥胖[中图法分类号]R392.2;R39433;R394.2[文献标志码]APotassiumchanneltetramerisationdomaincontaining15reg
4、ulatespreadipocytedifferentiation12211XuJing,ZhaoXu,YangYing,XuZihui(DepartmentofEndocrinology,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,2Chongqing,400037;DiseaseGenomicsandIndividualizedMedicineLaboratory,BeijingInstituteofGenomics,ChineseAcademyofSciences,Be
5、ijing,100029,China)[Abstract]ObjectiveTostudytheeffectofpotassiumchanneltetramerisationdomaincontaining15(KCTD15)geneonpreadipocytedifferentiation.MethodsTheexpressionofKCTD15geneduring3T3L1preadipocytedifferentiationwasdetectedbysemiquantitativereversetranscript
6、asePCR.AftertransferringKCTD15siRNAintothepreadipocytes,thecellmorphologywasobservedduringpreadipocytedifferentiationbyoilredOstaining,andtheleveloftriglyceridewasexaminedbyassaykit.Theexpressionofadipogenesisgenes,peroxisomeproliferatoractivatedreceptor(PPAR)γ,CC
7、AAT/enhancerbindingprotein(C/EBP)α,C/EBPβandC/EBPδwasdetectedbysemiquantitativereversetranscriptasePCR.ResultsTheexpressionofKCTD15genewasdecreasedduring3T3L1celldifferentiation.KCTD15geneknockdowninhibitedthedifferentiationandlipidaccumulationof3T3L1cells,andt
8、herewasnosignificantchangeintheexpressionofPPARγ,C/EBPα,C/EBPβandC/EBPδ.ConclusionKCTD15genedeficiencyleadstotheinhibitionof3T3L1preadipocytedif
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