鸭前脂肪细胞分化调控及fas与scd1基因的克隆与表达

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1、分类号ｇ８３４＿学号８２０１１０８０６四川农化大学博ｚＬ学位论文胃Ｉｙｍ．＇＾Ｐ前脂肪细胞分化调控及ＡＪＳ与说！０／基因新克隆与表达ｋ了芳Ｊ。巧导教巧王维义＆巧（四川化叱女聲）－巧ＪａｍｅｓＮｔａｍｂＫａｆｉ巧ｉｌｌ车大挙）占讓学科专业动巧遗传育种与繁巧研究方向水禽遗传育种论文答辩时间觀Ｉ２０巧年６月１论文指导小组成员李亮教授刘贺贺副研究员本论文由２０１１ＮＺ００９９－８）四川省

2、禽育种攻关项目．，（Ｎ０四川省教育厅创新团队项目（Ｎ０．１３ＴＤ００３４），２０１４ＮＺ００３０－１）四川省产业链项目（Ｎ０．资助＂本论文在四川农业大学畜熏适传资源发掘与创＂新利用四川省重点实验室完成本研究得到中国国家留学基金委支持特此致谢ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤｏｃｔｏｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＲｅｕｌａ村ｏｎｏｆｄｕｃｋｐｒｅａｄｏｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎ村ａｔｉｏｎａｎｄ化

3、ｅｃｌｏｎｅａｎｄｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｔｔｅｒｎｓｏｆＦＡＳａｎｄＳＣＤｌｅｎｅｐｇＤｉｎＦａｎｇｇＤｉｒｅｃｒｏｆ－ｔｅｄｂｙ．ＷａｎＪｉｗｅｎＰｇＰｒｏｆ．ｔＪａｍｅｓＮｔａｍｂｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｎｉｍａｌＧｅｎｅｔｉｃｓＢｒｅｅｄｉｎａｎｄＲｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｇｐ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＷｅｎｉａｎ６１３１１０ＳｉｃｈｕａｎＰ．Ｒ＾Ｃｈｉｎａｊｇ，，，Ｊｕ

4、ｎｅ２０１５，论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：义年＾月日关于论文使用授巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有

5、权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复巧件和电子版允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可［＾＾用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。□本论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＂＂（请在上□内划Ｖ）研究生签名：义０／Ｔ年月成曰了等ｊ导师签名：年＾月日四川农业大学博±学位论文摘要。脂肪组织是禽类脂质沉积的主要部位，在稳定机体代谢平衡中发挥重要作用前脂一肪细胞是类具有

6、增殖和定向分化为脂肪细胞的前体细胞，目前关于水禽前脂肪细施的。体外培养及其分化调控还缺乏系统的认识本研究Ｗ北京鸭为试验材料，首次分离培养一鸭前脂肪细胞，个体外诱导细胞分化的模型，利，摸索最佳诱导方式建立；其次用体夕Ｆ分离培养前脂肪细胞的模型，分别研究了罗格列醒（ＲＳＧ）、族岛素和地塞米松（ＤＥＸ）■Ｏ云种因素对鸭前脂肪细胞分化的调控机理。最后，克隆脂肪分化关键基因ＦＡＳ和ＳＣｉ，检测其发育性表达模式，初步探讨二者在脂肪分化过程中的作用。本研究取得的主要结果和结论如下：一

7、（１）周龄农华肉鸭皮下脂肪组织为材料，用胶原酶消化法可Ｗ分离培养出较多的成分均一原代前脂肪细胞。鸭前脂肪细胞在接种后的第Ｈ天开始迅速增殖，第毛天后细胞生长进入平台期。在膜岛素，ＤＥＸ，旧ＭＸ和油酸的共同诱导下，梭形的前脂肪细胞，，经过８天的诱导，大多数细胞分化为圆形的成熟脂肪细胞。此时细胞内沉积大脂滴油红０染色为红色证实细胞已分化成熟。鸭前脂肪细胞分化过程中，Ｃ／方及价ｔ表达量呈上升趋势，并在分化第五天达到峰值，然后再降低；表达在分化第Ｓ天最大，然后逐渐降低；而Ｅ４公八／

8、在整个分化过程中都呈现増强的表达趋势，在分化末期表达量最大。（２）罗格列厕对鸭脂肪分化的影响主要体现在脂肪合成与酷解两方面。添加罗格列醒处理体外分离培养鸭皮下前脂肪细胞，无论是否添加油酸诱导细胞分化，罗格列丽都一。能显著提寓鸭前脂肪细胞分化，促进脂肪形成方面，罗格列丽能显著提高脂肪合成相关基因ｍＲＮＡ表达量（如：Ｆ乂Ｓ，＾ＣＣ，化７公厶化Ｗ等）Ｗ及蛋白含量（如；乂＾ＣＣ一），诱导细胞分化另方面，罗格列丽也能提高细胞内如ＧＩ的ｍＲＮＡ表达量与。蛋白浓度，