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1、几种草莓优良品种组培快繁与脱毒苗生产技术探究摘要：以7个草莓优良栽培品种的匍匐茎为起始材料，试验出以MS为基本培养基附加BA0.5mg/L诱导草莓匍匐茎芽和茎尖植株再生、增殖、生根的培养基，确立了草莓组培快繁技术方法，同时探讨低成本下草莓试管苗的快繁技术，不仅能快速培养出大量脱毒苗，而且能取得较好的社会和经济效益。关键词：草莓；组培快繁；茎尖脱毒；生产应用草莓(FragariaananassaD.)是蔷薇科草莓属多年生常绿草本植物，其果品富含蛋白质、有机酸、维生素以及磷、钙、铁、锌等矿物质，是营养丰富、经济价值很高的上等果品。除了鲜食，草莓也是加工果酱、果酒等的重要原料，在世界
2、浆果类水果生产中，其栽培面积和产量仅次于葡萄［1］。我国草莓生产发展迅速，近几年来栽培面积迅速扩大，已经成为栽培草莓最多的国家之一。草莓的种苗生产传统上采用匍匐茎繁殖和分株繁殖，而长期使用无性繁殖方法会使草莓品种退化，病毒感染严重［2］。利用草莓茎尖培养快繁技术可部分或全部脱除病毒，保持草莓品种的优良性状，提高产量；繁殖快，对新品种的推广有利，快速繁殖不受季节影响，一年四季均可进行。在人工控制的条件下，可工厂化育苗，根据生产需要为生产提供种苗。近些年，我们进行了大量的研究，以期能快速繁殖并培育出优良草莓品种，同时探讨低成本下草莓试管苗的快繁技术。1材料与方法1.1材料选取的材料
3、C1-C7全部为当前草莓优良栽培品种，市场应用推广价值高，由新疆生产建设兵团阿拉尔现代农业示范区核心区十团苗木基地提供。1.2方法1.2.1培养基的配制。用于草莓匍匐茎芽和茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS附加6-BAO.5mg/L,蔗糖30g/L,琼脂粉5.Og/L,pH值调至5.8。在草莓扩繁阶段，采用MS培养基附加6-BA0.5mg/L.NAA0.Olmg/L,所用培养基中以3%食用白砂糖代替蔗糖，加琼脂粉0.5%,以自来水代替蒸馆水，pH值在高压灭菌前调至5.8。1.2.2材料的消毒与处理。选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚未展开的匍匐茎顶端约3〜4cm长的芽，用自来
4、水冲洗2〜3h后，在超净台上进行灭菌处理。先用小蹑子将匍匐茎的外部大叶摘除，再用75%酒精处理30s,然后置于0.2%的升汞中消毒3〜6m,再用无菌水冲洗3〜4遍。1.2.3诱导分化与增殖。（1）以草莓匍匐茎芽为试材，以附加BA0.5mg/L的MS培养基诱导和增殖草莓小苗，每瓶接种3个材料。（2）在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶,直至半圆球的顶端分生组织充分暴露出来,切取0.5mm左右大小茎尖接种于附加BAO.5mg/L的MS培养基上诱导培养,每瓶接种1个材料。接种后移至培养室内培养。培养条件为光照1500〜2500lx,14h/d,温度（25±1）°Co把诱导分化出的草莓小
5、苗转接入继代增殖培养基，培养基成分同诱导分化培养基。转接时把芽团分细小些，约5株/瓶，30d左右继代1次，记录组培苗的增殖情况。1.2.4扩大繁殖。将丛生苗分块即每5〜7株切成一块,转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。1.2.5生根与移栽。将生长健壮，苗高2〜3cm的试管苗移到生根培养基（1/2MS+IBAO.lmg/L）上生根，30d后移栽。2结果与分析2.1不同消毒时间，不同接种部位对草莓出芽率诱导分化的影响由表1可知，所选取的7种草莓优良品种匍匐茎不同部位经清洗消毒后接种均能获得无菌试管苗，结果表明
6、，匍匐茎出芽率上段〉中段〉下段，这与顶端分生组织生长旺盛有关。"Cl,C2,C3,C4,C5”5个品种通过切取茎尖技术培育草莓无菌试管苗均获得无菌试管苗，不同品种的芽诱导率不同，茎尖出芽率C3>C5>C2〉C4〉C1,C3最高70%,C1最低30%o在同一培养基上，15d后观察以0.2%升汞处理4m较为适宜，成活率较高。2.2匍匐茎芽和茎尖诱导分化培养观察将匍匐茎芽接种到诱导培养基上，2〜3d芽变绿，开始生长，7〜10d后伸长至lcm左右，将芽切下转移至增殖培养基（同诱导培养基）培养，20d后即可看到叶原基形成可见的小叶，30〜40d后可长成具有数片真叶的幼苗。将茎尖接种到诱导
7、分化培养基上，14d后颜色逐渐变绿，基部逐渐膨大。30d后，即可看到明显伸长的小茎，叶原基也形成可见的小叶，50d后可长成具有数片真叶的幼苗。2.3增殖培养观察将诱导分化出的草莓小芽接种于增殖培养基上（同诱导培养基），小苗株基部的腋芽2周内就能萌发，4〜5周内就可增殖形成丛生芽丛，芽丛直径可达4〜5cm,有15〜25个芽，每芽有2〜3片叶。每隔4〜5周将芽丛分割，转接到扩繁培养基上继代。2.4生根培养草莓比较容易在培养基上生根，1/2MS就可达到最好的生根效果。以1/2MS+IBA0.lmg
